王恩旺,杨小龙,邓小乐
(1.马鞍山市人民医院 心胸外科,安徽 马鞍山 243000;2.皖南医学院附属弋矶山医院 心胸外科,安徽 芜湖 241001)
p300/CBP为组蛋白乙酰转移酶,是同源转录辅助激活因子,具有内在乙酰转移酶活性。Smad4为抑癌基因,是目前发现的惟一一种CO-Smads,其蛋白产物是TGF-β超家族受体的直接底物。p300/CBP可通过与Smads结合增强TGF-β诱导的转录活性。本实验采用免疫组织化学的方法(SABC法),测定肺癌和正常肺组织中p300/CBP、Smad4蛋白的表达,观察其结果与肺癌临床病理的关系,并分析它们之间的相关性,旨在探讨 p300/CBP、Smad4在NSCLC发病机制中的作用,同时为p300/CBP、Smad4用于NSCLC的抗肿瘤治疗提供一定的实验和理论依据。
1.1 临床资料 选用2008年1月~2009年1月皖南医学院附属弋矶山医院术前未经放疗和化疗的原发性肺癌手术标本(石蜡包埋)60例。取上述标本中距离肿瘤边缘6 cm以上的正常肺组织20例、并经病理检查排除肿瘤累及。标本经10%甲醛固定,常规脱水,石蜡包埋,4 μm厚度连续切片,进行免疫组织化学染色,其中一片行HE常规染色用于病理诊断。组织病理分型、分级由病理科诊断。60例NSCLC中男性43例,女性17例。≥55岁33例,<55岁27例。病理分型:肺鳞癌38例,肺腺癌22例。中心型肺癌28例,周围型肺癌32例。无淋巴结转移17例,有淋巴结转移43例。按1997年国际抗癌联盟(UICC)新修订的肺癌TNM分期:ⅠA期3例、ⅠB期14例、ⅡA期12例、ⅡB期17例、ⅢA期14例,无ⅢB、Ⅳ期病例。肿瘤直径>3 cm 29例,≤3 cm 31例。分化程度:高分化+中分化为39例,低分化21例。
1.2 主要试剂 Smad4浓缩型兔多克隆抗体(武汉博士德),p300/CBP浓缩型鼠抗人单克隆抗体(NeoMarker),SABC免疫组化试剂盒和3-3'二氨基联苯胺(DAB)显色试剂盒(武汉博士德)。……