DNA甲基化转移酶1在非小细胞肺癌中的

表达及临床意义

刘启明

(江苏省睢宁县人民医院呼吸内科,江苏徐州,221200)

近10年来,肺癌的发病率和死亡率一直位居各种恶性肿瘤首位。肺癌的发生也是多因素作用、多基因参与、经过多个阶段才最终形成的极其复杂的生物学特征。DNA甲基转移酶 1(DNMT1)是细胞生命所必需的蛋白,其催化的甲基化修饰在调控细胞正常生长中有重要作用。DNA的甲基化有其重要的生物学意义,它在控制基因的表达、维持染色体的完整性和调节DNA的重组等方面都有重要的作用[1]。DNMT1在肺癌组织中表达以及与肿瘤的分期、分化程度、年龄、性别、吸烟等临床特征的关系,目前国内外研究的较少。本实验采用免疫组织化学技术检测非小细胞肺癌组织中和DNMT1蛋白表达情况,并探讨表达与患者临床特征的关系。为探讨DNMT1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的发病机制、病理诊断、预后价值以及为选择治疗的靶点提供一定的理论和实验依据。现报告如下。

图1 病理分型

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择本院胸外科2005年3月～2008年10月手术切除的NSCLC(术前均未行化疗和放疗)标本54例。其中男33例、女21例,<60岁者28例;≥60岁者26例;有长期吸烟史22例,无吸烟史32例;鳞癌 25例,腺癌 29例,见图 1;高分化11例,中分化 31例,低分化12例;Ⅰ期 22例,Ⅱ期10例,Ⅲ～Ⅳ期22例(根据术后病理,依据1997国际抗癌联盟制定的肺癌TNM分期标准进行分期)。并分别取癌旁组织(在癌灶周边5 cm内的肺组织)48例及周围正常肺组织(远离癌灶5 cm以上,且镜检无癌细胞)24例。所有组织标本使用中性甲醛固定,石蜡包埋备用。

1.2 方法

组织学染色:肺组织病理标本使用中性甲醛固定,石蜡包埋,5 μ m连续切片,常规 HE染色。测定程序性细胞死亡4(PDCD4)和DNMT1的免疫组织化学染色:①石蜡切片置于60℃烤箱中烤片2 h,常规脱蜡入水;蒸馏水冲洗1次;②0.01 mol/L枸橼酸缓冲液(pH 6.0即配即用)微波炉抗原修复,加热至沸腾,自然冷却;③0.01 mol/L磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗3 min×3次;④3%过氧化氢室温孵育10 min,以阻断内源性过氧化物酶……