细胞外信号激酶蛋白5在卵泡刺激素介导的卵泡颗粒细胞甾体激素生成中的作用

高小博,姚 楠,马 旭,陆彩玲,杨伯清,彭小忠

1中国医学科学院 北京协和医学院 基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京 100005

2国家人口计生委科学技术研究所遗传室,北京 100081

3中国医学科学院 北京协和医学院 医学信息研究所基层卫生与妇幼保健研究室,北京 100020

卵泡是卵巢的基本组成单位,由卵母细胞、颗粒细胞和膜细胞组成。颗粒细胞随卵泡的发育而增殖和分化,在垂体分泌的促性腺激素卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)和促黄体生成素(luteotropic hormone,LH)刺激下,颗粒细胞可产生甾体激素雌激素和孕酮,对卵泡发育和怀孕等生殖功能发挥关键的调节作用[1]。甾体激素合成急性调节蛋白StAR参与甾体激素的前体胆固醇由线粒体外膜向线粒体内膜的转运,是甾体激素生物合成的必经途径[2-3]。促性腺激素主要通过G蛋白激活腺苷酸环化酶引起细胞cAMP增加和激酶A(protein kinase A,PKA)激活,随后激活一系列信号通路来诱导调节甾体激素生成基因的表达。有研究表明,细胞外信号激酶蛋白1/2(extracellular signal-regulated protein kinase 1/2,ERK1/2)等经典MAPK通路参与了促性腺激素介导的甾体激素生成[4-6]。细胞外信号激酶蛋白5(extracellular signal-regulated protein kinase 5,ERK5)是近年来发现的MAPK家族成员[7-8],本研究探讨了ERK5在颗粒细胞甾体激素生成过程中的作用。

材料和方法

材料 出生23 d的雌性SD大鼠,体重40～45 g,购自北京大学医学部实验动物中心;孕马血清促性腺激素 (pregnant mare serum gonadotropin,PMSG)干粉购自北京海德创业生物公司,DMEM/F12培养基、胎牛血清 (fetal bovine serum,FBS)、胰蛋白酶、青霉素和链霉素购自美国Hyclone公司,ERK5和StAR抗体购自美国Santa Cruz公司,ERK5特异性磷酸化抗体购……