ELISA检测中全自动加样引起拖带假阳性现象的对策分析

潘志勇

随着全自动加样设备在血液筛查中的广泛应用，其加样过程导致的拖带现象已引起高度关注。笔者在进行血液标本加样检测过程中，发现抗体强阳性标本，引起拖带现象(以抗-HIV为例)进行统计分析，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 血清标本 均来自我站街头无偿献血者。

1.2 试剂 ELIST试剂为法国伯乐公司生产，在有效期内使用。

1.3 仪器 RSP 150＆BEP III全自动酶免系统深圳赛勒公司提供。

1.4 方法 根据检测项目和试剂说明书的要求，在RSP 150及BEP III控制微机上编制加样程序，加样方向从标本架1起、酶标板从1到12。吸取分配不同的液体试剂或血清标本后，RSP 150按编制程序自动冲洗加样针。

2 结果

2.1 第1例抗-HIV阳性拖带现象检测 出现在抗-HIV同一块酶标板的H2、H3、H4……H7位置上，标本检测OD值见表1。本次实验的Cut off值为0.134，故6份标本5份阳性1份为“灰区”，根据抗-HIV检测规程，6份标本重新双孔复试，结果H2标本检测OD值分别为2.759，2.543仍为强阳性，H3标本OD值分别为0.456，0.403为弱阳性，其余4份样本双孔复试为阴性，把H2、H3标本送市疾控中心HIV确认实验室经蛋白印迹法(WB)确认，H2为抗-HIV阳性，H3为抗-HIV阴性。后追踪相应血袋辩子标本并进行检测，H2样本WB和ELISA结果为阳性，H3样本WB和ELISA均为阴性。

2.2 第2例抗-HIV阳性拖带现象检测 出现在抗-HIV同一块酶标板的E9、E10、E11、E12位置上，标本检测 OD值见表2。本次实验的Cut off值为0.146，4份标本双孔复试，结果E9标本检测OD值分别为3.110，3.188仍为强阳性，其他3份样本双孔复试为阴性，把E9标本送市疾控中心HIV确认实验室经蛋白印迹法(WB)确认，仍为抗-HIV阳性。

表1 第1例拖带阳性检测结果

表2 第2例拖