马思泉
山东省菏泽市第二人民医院胸外科,山东菏泽 274005
乳腺癌近年来发病率呈直线上升趋势,而且发病年龄趋于年轻化,而远处转移是患者的主要死亡原因。目前患者体内存在的微小转移癌灶尚难发现,早期筛选出具有转移危险性的患者,予以彻底控制是提高乳腺癌疗效的关键。本研究旨在探讨组织蛋白酶D(cathepsin D,Ca-D)和E-钙黏附蛋白(epithelial Cadherin, E-Ca)在乳腺癌组织中的表达情况,并预测其在预后估计中的作用。
收集笔者所在医院2002~2008年手术切除后经病理证实,且有3年以上随访资料的女性乳腺癌患者106例作为研究对象,同时选取乳腺增生性病变即纤维腺瘤作为对照。患者年龄21~81岁,采取乳腺癌根治或改良根治术。患者术前未经过任何治疗,术后进行正规化疗。
按照同侧腋窝淋巴结有无转移及转移个数分为3组:无淋巴结转移者为第1组,转移个数1~3个(含3个)者为第2组,转移个数4个或4个以上者为第3组。
采用链霉菌抗生素蛋白-过氧化物酶法(S-P法)染色法(S-P试剂盒及一抗均购自福州迈新公司),DAB显色,实验步骤严格按照说明书进行。用已知阳性切片作为阳性对照,以磷酸盐缓冲液代替一抗作为阴性对照。
采用双盲法。阳性结果呈棕黄色颗粒状,随机选取10个高倍视野,计算着色肿瘤细胞占细胞总数的百分比。按照参考文献对不同抗体染色结果进行判断,CD34染色标记血管内皮细胞,先在低倍镜下找到新生血管密集区,在200倍视野下观察、计数5个视野下血管总数,取其平均值作为该患者的微血管密度(microvessel density,MVD)。……