元海成,秦鸣放,邹富胜,张 辰,李东华
急性胆道梗阻可以通过结扎啮齿动物的胆总管复制。大鼠的胆总管结扎(bile duct ligation,BDL)的模型已经有描述,在以往研究多选择一个或两个研究时间点[1-3],缺乏对不同时间点相关变化的详细说明。国内文献对胆总管结扎模型的建立过程描述过于简单,甚至无法重复。本研究详述BDL后不同时间点相关变化,为大鼠胆总管结扎模型建立提供影响因素的实验依据。
1.1 动物 雄性Wistar大鼠90只。年龄11~13周,体重250~300 g,由中国医学科学院放射医学研究所实验动物中心(SCXK津2005-0001)提供。标准条件下喂养,并保持手术前至少7 d的12 h白-黑周期的环境条件。经检疫合格,无疾病者入选。
1.2 分组及造模 采用随机数字表方法分成模型组和假手术组。术前禁食15 h,不禁水,称大鼠质量,以100 ml/L的水合氯醛3 mL/kg腹腔注射麻醉,将大鼠固定于手术台上,剑突下上腹部备皮,碘伏消毒。模型组动物脐上腹正中切口2~2.5 cm入腹,暴露胆总管,在肝右叶下缘与胆总管交点处(肝右叶及乳头叶胆管汇入胆总管位置最低,保证在所有肝叶胆管汇入点下方),分离胆总管、以6-0丝线单线结扎胆总管。假手术组动物只剖腹,分离胆总管不结扎。所有动物腹腔滴入0.2 mL左氧氟沙星注射液,关闭腹膜及皮肤层,双层关腹。术后5 h进水,20 h进食。
1.3 观察指标 术后每日观察两组动物活动状态,进食及黄染情况,动物进行称重。第1、2、3、5、7 d,每组各处死8只动物。动物麻醉后,开腹暴露腹腔,腹主动脉抽血约3~5 mL,室温下3 000 r/min离心15 min,取1.5 mL血清,用EP管保存送检,行血清行总胆红素(TBIL)、直胆红素(DBIL)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)生化指标检查。……