荧光光谱法分析米诺环素与人血清蛋白的相互作用

叶蕾，胡卢丰，杜晓翔，林观样

(温州医学院附属第一医院药剂科，325000)

米诺环素(minocycline)是一种新型的四环素类抗生素，在临床上有着广泛的应用。它是通过阻断细菌蛋白质合成的各个环节、抑制细菌的复制，达到抗菌的效果，对衣原体、支原体、厌氧菌敏感。人血清清蛋白(human serum albumin，HSA)由585个氨基酸分子组成，单链，非糖基化，相对分子质量为67 000，HSA氨基酸全序列由三个序列相似的α-螺旋结构域组成(Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ)，每个结构域又包含两个亚结构域(A和B)，其中结构域ⅡA和ⅢA能够与内源及外源物质相结合[1]。清蛋白对药物的结合是机体处置药物的重要方式之一，尤其对于像米诺环素这类清蛋白结合率高(结合率75%)、不良反应大的药物，蛋白结合率的改变，有可能导致严重后果。

近年来，一些学者采用荧光光谱法研究药物与清蛋白或者DNA的相互作用[2-3]。荧光光谱法是研究生物大分子与小分子、离子相互作用的重要手段，能得到小分子与蛋白质作用的结合常数[4]。虽然也曾有文献报道米诺环素与牛血清清蛋白(bovine serum albumin，BSA)的结合作用[5]，但由于BSA与HAS来源不同，且在氨基酸序列上存有差异，因此不能为临床用药提供准确可靠的参考依据。笔者应用荧光光谱法研究米诺环素与HSA结合作用，从分子水平了解米诺环素与HSA分子之间的相互作用机制，为临床合理用药提供参考。

1 材料与方法

1.1 仪器与试药荧光分光光度计(日本岛津，RF-5301PC);Millipore超纯水系统(Millipore);盐酸米诺环素(中国药品生物制品检定所);人血清蛋白[奥克特珐玛药剂生产有限公司(奥地利)，批号A942C6661];Tris-HCl(美国Serva公司);其他试剂均为分析纯，实验用水均为二次蒸馏水，HH-4数显恒温水浴锅(上海江星仪器有限公司)。……