轮状病毒肠道内外感染患儿细胞免疫功能检测与分析

薛黎明,卞新南,薛 雪

(江苏省苏州市市立医院东区儿科,江苏苏州,215001)

轮状病毒(rotavirus,RV)是秋、冬季小儿腹泻最常见的病原体。人类感染轮状病毒后由于小肠上皮细胞黏膜受损导致细胞对体液和电解质控制能力丧失,肠道分泌与吸收能力失衡引起腹泻[1]。并引起全身多器官损害,如中枢神经系统、呼吸系统、循环血液系统、消化系统等损害[2]。其确切损伤机制尚不明确,可能与细胞免疫功能有关。为了解轮状病毒肠炎患儿细胞免疫功能变化,对轮状病毒肠炎患儿细胞免疫状况进行检测,现报告如下。

1 对象和方法

1.1 对象

选取2009年10月～2010年3月 40例因RV肠炎住院治疗的患儿,诊断标准依据《实用儿科学》第7版,大便RV检测(ELISA法)为阳性。其中20例为RV肠道内感染患儿,男12例,女8例;平均年龄(32.7±6.25)个月。另20例为RV肠炎并发肠道外感染(并发呼吸道感染10例,心肌酶谱异常6例,肝功能异常4例),男 14例,女6例;平均年龄(33.1±6.18)个月。对照组20名为我院儿保门诊体检的健康儿童,男11名,女9名;平均年龄(33.2±5.96)个月;近2周内无肠道感染,无过敏性及免疫相关的疾病。各组年龄、性别差异均无统计学意义。

1.2 方法

T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞、NK细胞检测:花青藻红素-5(PE-CY5)标记抗CD3+抗体,异硫氰酸荧光素(FITC)标记CD4+抗体,藻红朊(PE)标记抗 CD8+抗体、CD16+CD56+抗体和CD25+抗体,花青藻红素-5(PE-CY5)标记抗CD19+抗体。取外周血,肝素抗凝,每管 50 μ L全血中加入不同荧光素标记的抗体,轻轻混匀后暗室下孵育,然后加入溶血素(OptiLyse)裂解红细胞,轻轻混匀后再次暗室下孵育,经离心、洗涤后流式细胞仪上进行分析。……