血管紧张素-(1-7)与血管紧张素Ⅱ对THP-1巨噬细胞NPC1表达及胆固醇流出的影响*

李 慧， 杨志明△， 肖传实， 康玉明

(1山西医科大学第二医院心血管内科，山西 太原 030001；2西安交通大学医学院生理学教研室，陕西 西安 710061)

血管紧张素-(1-7)与血管紧张素Ⅱ对THP-1巨噬细胞NPC1表达及胆固醇流出的影响*

李 慧1， 杨志明1△， 肖传实1， 康玉明2

(1山西医科大学第二医院心血管内科，山西 太原 030001；2西安交通大学医学院生理学教研室，陕西 西安 710061)

目的研究血管紧张素-(1-7) [Ang-(1 -7) ]与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对C型1类尼曼-匹克蛋白(NPC1)表达及胆固醇流出率的影响，探讨Ang-(1-7)对AngⅡ在胆固醇逆转运方面的拮抗作用。方法体外培养的人THP-1单核细胞经佛波酯(PMA)诱导48 h,使之分化为巨噬细胞，随机分为对照组、AngⅡ组、Ang-(1-7)组、AngⅡ+Ang-(1-7)组和AngⅡ+ Ang-(1-7) + Ang-(1-7)受体阻断剂A-779组。运用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)和Western blotting蛋白印记技术分别检测NPC1 mRNA与蛋白的表达水平，应用液体闪烁计数仪检测胆固醇流出的变化。结果与对照组相比，AngⅡ能引起THP-1源性巨噬细胞NPC1 mRNA与蛋白质表达的下调及胆固醇流出的减少(P< 0.05)；Ang-(1-7)使NPC1蛋白和mRNA表达升高，胆固醇流出增多(P<0.05) ；混合刺激组中, 不同浓度的Ang-(1-7) ( 100-10 000 nmol/L)呈剂量依赖性地减轻AngⅡ对THP-1源性巨噬细胞 NPC1蛋白和mRNA表达的抑制作用，促进细胞胆固醇流出，与AngⅡ组相比差异显著(P<0.05) ；加入A-779 组与AngⅡ组比较无显著差异(P>0.05)。结论Ang-(1-7) 通过其特异性受体Mas拮抗AngⅡ抑制的THP-1巨噬细胞NPC1的表达，并呈浓度依赖性，进而促进巨噬细胞内胆固醇流出,抑制动脉粥样硬化的发生发展。

血管紧张素Ⅱ； 血管紧张素- (1-7) ； C型1类尼曼-匹克蛋白； 巨噬细胞； 动脉粥样硬化

C型1类尼曼-匹克蛋白(Niemann-Pick C1 protein,NPC1) 是细胞晚期内体中含有的一个固醇感受域跨膜糖蛋白[1]。内体是膜包裹的囊泡结构,有早期内体和晚期内体之分, 早期内体是由于细胞的内吞作用而形成的含有内吞物质的膜结合的细胞器。在正常细胞中, 低密度脂蛋白经受体介导内吞到达早期内体。……