荞麦过敏原特异性抗体酶联免疫吸附法检测试剂制备

张 昕，崔晓东，王转花

(1.山西大学环境科学与工程研究中心，山西 太原 030006；2.山西大学生物技术研究所，山西 太原 030006)

荞麦过敏原特异性抗体酶联免疫吸附法检测试剂制备

张 昕1，崔晓东2，王转花2

(1.山西大学环境科学与工程研究中心，山西 太原 030006；2.山西大学生物技术研究所，山西 太原 030006)

以天然苦荞过敏蛋白包被聚苯乙烯微孔板，以鼠抗人IgE抗体标记辣根过氧化物酶，以间接酶联免疫吸附法(indirect enzyme-linked immunosorbent assay，IELISA)检测病人血清中的特异性抗体，分析并建立关键操作步骤及反应条件。结果表明：ELISA反应的最适工作条件为包被的抗原质量浓度100μg/mL、阳性血清稀释度1:50、酶标二抗稀释度1:1000，37℃时封闭的最佳时间为40min，包被抗原与阳性血清中抗体的最佳作用时间为40min，阳性血清与酶标二抗的最佳作用时间为40min。本方法具有良好的特异性、重复性和精密度。

苦荞；过敏蛋白；试剂盒；间接酶联免疫吸附法

食物过敏同保健食品和食品安全等，已成为食品卫生研究中的重要问题。全球范围内，大约有4%～6%的儿童和2%的成年人有食物过敏症[1]。患者一旦发生食物过敏，症状通常十分严重。目前，我国对于食品过敏研究还没有引起足够的重视，与国外发达国家相比有较大的差距，这对于我国全民的身体健康构成了很大的威胁。过敏原无处不在，因此患者清楚自己对何种食品过敏，及早避开这些过敏原就显得至关重要。

近年来，富含生物类黄酮及多种生物活性成分的荞麦、燕麦等产品不断问世，而食用这些食品引起的不同程度过敏症也成为了生物学和医药学领域普遍关注的热点问题。……