乙醇溶液体系中Span修饰猪胰脂酶的研究

曾 俊，杨国龙，毕艳兰，张 洁，孙尚德

(河南工业大学粮油食品学院，河南郑州450052)

乙醇溶液体系中Span修饰猪胰脂酶的研究

曾 俊，杨国龙*，毕艳兰，张 洁，孙尚德

(河南工业大学粮油食品学院，河南郑州450052)

在乙醇-水溶液体系中采用Span系列表面活性剂对猪胰脂酶进行了修饰，以其催化酯交换的交换量为指标衡量修饰的效果，并且比较了修饰酶与未修饰酶的热稳定性差异。结果表明:40℃下30min即可完成Span对猪胰脂酶的修饰，但各种表面活性剂修饰的最佳条件并不相同。Span20修饰脂肪酶的最佳条件是水与乙醇的比例为4∶1(v/v)，Span20用量为25%;Span40修饰猪胰脂酶的最佳条件是水与无水乙醇的比例为2∶1(v/v)，Span40用量为20%; Span65修饰猪胰脂酶的最佳条件为水与无水乙醇的比例为1∶1(v/v)，Span65的用量为20%;Span60、Span80和Span85修饰脂肪酶的最佳条件是水与无水乙醇的比例为3∶1(v/v)，用量均为20%。通过修饰后酶的热稳定性实验可以看出，六种表面活性剂修饰的酶在30～70℃间催化反活性都高于未修饰酶，在40℃下，修饰酶的催化活性基本达到最高，而未修饰酶要70℃才能达到最高催化活性。Span60修饰脂肪酶的效果优于其它五种表面活性剂。

猪胰脂酶，Span，修饰，乙醇溶液

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

猪胰脂酶 购于Novo公司;茶油 购于河南信阳长园野生茶油有限公司;棕榈酸、Span表面活性剂购于Sigma公司;其他化学试剂 均购于天津市科密欧化学试剂有限公司，色谱纯。

气相色谱仪 Agilent6890N，美国Agilent公司;色谱柱 BPX-70(30.0m×250μm×0.25μm)，澳大利亚SGE公司。

1.2 实验方法

1.2.1 猪胰脂酶的修饰

1.2.2 修饰前后脂肪酶促酯交换反应催化活……