平菇基因组DNA提取方法的研究

闫 燕，许文涛，苏春元，罗云波，王一南，谷新晰，戴蕴青，田洪涛，*

(1.河北农业大学食品科技学院，河北保定071001; 2.中国农业大学食品科学与营养工程学院，北京100083; 3.农业部转基因生物食用安全监督检验测试中心(北京)，北京100083)

平菇基因组DNA提取方法的研究

闫 燕1，2，3，许文涛2，3，苏春元2，罗云波2，王一南3，谷新晰1，戴蕴青2，3，田洪涛1，*

(1.河北农业大学食品科技学院，河北保定071001; 2.中国农业大学食品科学与营养工程学院，北京100083; 3.农业部转基因生物食用安全监督检验测试中心(北京)，北京100083)

以实验室自行培育的平菇为实验材料，分别使用CTAB法、SDS-CTAB法以及高盐酶解法提取平菇基因组DNA，并通过紫外分光光度计、限制性酶切及PCR检测来衡量基因组质量。结果表明，使用CTAB法很难得到高质量的基因组DNA，OD260/280仅为1.5左右，而且伴有较多的杂质，电泳条带拖尾严重;使用EcoRI限制性酶对其进行酶切分析，效率较低，同时PCR检测不能得到有效扩增;而使用优化后的SDS-CTAB法及高盐酶解法提取平菇DNA，能够获得质量高、纯度好的基因组DNA，OD260/280基本保持在1.8～2.0之间，电泳条带较为清晰均一，使用EcoRI限制性酶对其进行酶切分析，酶切效果较好，并且DNA质量能够满足PCR检测的模板要求。说明SDS-CTAB法以及高盐酶解法提取的平菇DNA能够满足分子水平操作的要求，两者相比，前者成本较低，后者产率较高。

平菇，基因组DNA，提取方法

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

平菇 实验室自行培育、分离，研究部分为菌皮、菌肉、菌褶以及菌柄四部分，分别标记为1、2、3、4号;DL2000 DNA marker(300ng/5μL) 大连宝生物工程有限公司……