嗜热真菌发酵产木聚糖酶培养基的优化及部分酶学性质的研究

张新峰，王伟平，汪 蓉，王琛琛，阳 飞，张华山，*

（1.发酵工程省部共建教育部重点实验室，湖北工业大学，湖北武汉430068；2.湖北大学知行学院，湖北武汉430011）

嗜热真菌发酵产木聚糖酶培养基的优化及部分酶学性质的研究

张新峰1，王伟平1，汪 蓉2，王琛琛1，阳 飞1，张华山1，*

（1.发酵工程省部共建教育部重点实验室，湖北工业大学，湖北武汉430068；2.湖北大学知行学院，湖北武汉430011）

采用响应面法对嗜热真菌发酵产木聚糖酶的培养基进行优化以及对该酶液的基本性质进行研究。首先对初始培养基中的8种影响因素进行Plackett-Burman设计，筛选出3种重要影响因素，即玉米芯、尿素和KH2PO4；再利用最陡爬坡实验为中心组合实验确定最大响应区间，最后经响应面分析获得最优化结果：玉米芯浓度为4.570%（w/v），尿素浓度为1.797%（w/v），KH2PO4浓度为0.497%（w/v），酶活提高了18%。该酶对玉米芯为底物的专一性较好，最适酶促反应温度为65℃且在该温度下较稳定，最适反应pH为6.8，并且pH稳定性较好。

嗜热真菌，木聚糖酶，优化，酶学性质

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

嗜热真菌T-U-03-10（Thermomyces lanuginosusT -U-03-10） 为湖北工业大学生工楼207实验室保藏菌种；斜面活化培养基 PDA培养基；产酶基础培养基 玉米芯3.0%，尿素2.0%，KH2PO40.5%，ZnSO40.2%，MgSO4·7H2O 0.03%，CaCl20.03%，FeSO4·7H2O 0.03%，吐温-80 0.03%，pH6.5，于121℃灭菌30min；可溶性淀粉，羧甲基纤维素钠，中华一号滤纸，pH6.5磷酸缓冲液，0.1mol/L柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液（pH4.0～8.0），0.05mol/L甘氨酸-氢氧化钠缓冲液（pH9.0～10.0），DNS溶液[4]，其他药品均为分析纯。

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