任 聪,孟宪生,包永瑞
辽宁中医药大学药学院,辽宁大连 116600
体外筛选川芎治疗冠心病的有效成分的提取纯化工艺研究
任 聪,孟宪生,包永瑞
辽宁中医药大学药学院,辽宁大连 116600
目的:通过体外筛选方法,优选川芎治疗冠心病的有效成分的提取纯化工艺。方法:培养原代乳鼠心肌细胞,利用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)缺氧1 h复氧1 h,损伤心肌细胞制备心肌细胞缺氧-复氧损伤模型来模拟体内缺血再灌注损伤,通过体外筛选方法,优选出川芎治疗冠心病的有效成分的最佳提取和纯化工艺。结果:优选出川芎的最佳提取工艺为使用6倍量的水,提取2次,每次1 h;其纯化工艺为使用15 ml HPD-300树脂,取9 BV的0.5 g/ml的川芎提取液上样,以5 BV的50%醇洗脱。结论:通过体外筛选的提取纯化工艺可信度高,为开发研究心脑血管疾病的药物提供了依据。
川芎;提取;纯化;原代乳鼠心肌细胞;冠心病;连二亚硫酸钠
川芎是一种广泛应用于临床来治疗冠心病的常用中药,现代研究表明川芎具有清除氧自由基、钙拮抗、扩血管、抗血小板聚集和血栓形成等多种作用,本文通过原代乳鼠心肌细胞的培养,利用连二亚硫酸钠损伤心肌细胞来模拟体内缺血再灌注损伤,筛选出川芎治疗冠心病的有效成分及其最佳提取和纯化工艺。
1.1 药品和试剂
川芎(购于安国药材批发市场),经辽宁中医药大学翟延君教授鉴定为正品;四甲基偶氮唑酶(美国Difco公司);胶原酶Ⅰ (美国GIBCO公司);DMEM高糖和低糖培养液 (美国GIBCO公司出品);……