溶氧浓度对rhG-CSF工程菌高密度发酵的影响

岑 仡，童 涌，杨 峰

(1.上海三维生物技术有限公司，上海 201206； 2. 第二军医大学无机化学教研室，上海 200433)

溶氧浓度对rhG-CSF工程菌高密度发酵的影响

岑 仡1，童 涌1，杨 峰2

(1.上海三维生物技术有限公司，上海 201206； 2. 第二军医大学无机化学教研室，上海 200433)

目的确定rhG-CSF工程菌高密度发酵的最佳溶氧浓度。方法通过通入纯氧，高密度发酵的溶氧值可以精确控制。考察不同溶氧浓度对工程菌的生长、质粒丢失率、乙酸积累情况以及rhG-CSF表达的影响，来确定溶氧的最佳控制范围。结果工程菌生长阶段溶氧控制在25%，诱导后控制在35%，最有利于菌体生长和外源蛋白表达，最终菌体密度为(79.6±2.1)g/L，表达量为(40.2±1.2)%。结论溶氧对工程菌rhG-CSF高密度发酵有显著影响。

rhG-CSF; 高密度发酵; 溶氧

粒细胞集落刺激因子(G-CSF)是目前已知血细胞集落刺激因子中特异作用粒系祖细胞，促进其向成熟中性粒细胞增殖、分化，并维持其功能、存活的造血生长因子。它对于治疗由肿瘤放化疗、骨髓移植所引起的粒细胞减少症具有显著疗效[1]。由于rhG-CSF天然来源非常有限，利用基因工程重组技术，进行工程菌高密度发酵是大量获取有药用价值hG-CSF的一条重要途径[2]。

溶氧是影响高密度发酵的一个重要参数。工程菌在生长过程中，需要大量的氧气参与代谢，因而氧的供给非常重要。溶氧浓度过高或过低，都会影响菌体的生长和产物合成[3]。不同溶氧浓度(DO)对高密度发酵中的菌体生长、外源质粒丢失、乙酸的生成都会造成不同的影响，而这些因素又直接影响到外源蛋白的产量高低。……