宜宾浓香型白酒窖泥中细菌的系统发育多样性*

王涛，田时平，赵东，游玲，王松，冯瑞章，冯学愚，张云，崔晓龙

1(宜宾学院生命科学与食品工程学院，四川宜宾，644000)2(发酵资源与应用四川省高校重点实验室，四川宜宾，644000)3(云南大学省微生物研究所，云南，昆明，650091)4(五粮液股份公司，四川宜宾，644000)

宜宾浓香型白酒窖泥中细菌的系统发育多样性*

王涛1，2，田时平3，赵东4，游玲2，王松1，2，冯瑞章1，2，冯学愚2，张云1，崔晓龙3

1(宜宾学院生命科学与食品工程学院，四川宜宾，644000)2(发酵资源与应用四川省高校重点实验室，四川宜宾，644000)3(云南大学省微生物研究所，云南，昆明，650091)4(五粮液股份公司，四川宜宾，644000)

采用纯培养和免培养(culture-independent)分析方法，对宜宾多家规模以上白酒企业成熟窖泥细菌多样性进行了研究。采用改良牛肉膏蛋白胨培养基(NA)和高氏I号分离培养基分离细菌(包括放线菌)，并评价菌株的乙醇耐受能力和低pH耐受能力。构建了窖泥样品总DNA的16S rRNA基因克隆文库。分别挑选不同培养特征的89株细菌纯培养物和427个基因克隆的16S rRNA基因序列，进行系统发育分析。89株纯培养物分属于13个属，以Streptomyces(39株)和Bacillus(27株)为优势属。纯培养菌株中，具备7%浓度乙醇耐受能力和低pH(4.5)耐受能力的分别有16株和10株。挑取的克隆子经测序、去除嵌合体后，得到了406个有效序列，并在97%的序列相似性水平上可将其分为75个 OTU(Operational Taxonomic Unit)，分属于 Clostridia、Bacilli、Actinobacteria、γ-Proteobacteria、α-Proteobacteria、Deinococci、Planctomycea、Bacteroidia 8 个纲。其中 Clostridia 为绝对优势菌群，包含50个OTU、227个克隆子;Bacilli包含11个OTU、128个克隆子，为次优势菌群。证明宜宾浓香型白酒窖泥中细菌群落存在丰富的系统发育多样性。

浓香型白酒，窖泥，细菌，16S rRNA基因，系统发育多样性