杜氏盐藻FKBP cDNA的克隆及其在鞭毛解组装中的功能*

许 芳，石 科，李 靓，张楠楠，薛乐勋

郑州大学生物工程系细胞生物学研究室郑州 450001

#通讯作者，男，1944年2月生，教授，博士研究生导师，研究方向:肿瘤标志物与基因工程，E-mail:xuelx@zzu.edu.cn

杜氏盐藻FKBP cDNA的克隆及其在鞭毛解组装中的功能*

许 芳，石 科，李 靓，张楠楠，薛乐勋#

郑州大学生物工程系细胞生物学研究室郑州 450001

#通讯作者，男，1944年2月生，教授，博士研究生导师，研究方向:肿瘤标志物与基因工程，E-mail:xuelx@zzu.edu.cn

杜氏盐藻;FK506结合蛋白;鞭毛

目的:克隆杜氏盐藻FK506结合蛋白(FKBP)的cDNA片段并探讨其与鞭毛微管解组装的联系。方法:提取杜氏盐藻总RNA，根据已知盐藻FKBP cDNA 3’端序列，用5’RACE方法扩增该cDNA的5’端序列，拼接得到全长并对其序列进行分析。秋水仙碱处理对数生长期杜氏盐藻，处理0、20、40、60、80、100、120、140和160 min后采用实时荧光定量PCR检测FKBP mRNA的表达情况。结果:经5’RACE得到681 bp的FKBP cDNA片段，拼接后得到的cDNA全长1 075 bp，序列分析显示其开放阅读框为762 bp，编码253个氨基酸;经BLAST比对，其氨基酸序列具有FKBP家族特有的功能结构域，与莱茵衣藻、团藻、小球藻、大麦及水稻的同源性分别为61%、54%、47%、48%和51%。杜氏盐藻细胞FKBP mRNA表达量在秋水仙碱处理后20～40 min明显升高，而在40～100 min时逐渐下降，但仍高于对照组(F组间=32.580，P＜0.001;F时间=5.543，P=0.001;F交互=237.306，P＜0.001)。结论:得到了杜氏盐藻的FKBP cDNA全长序列;FKBP参与了杜氏盐藻微管解组装过程，可能参与了细胞通过鞭毛对外界应激反应的应答。

1989年，Siekierka等［1］和Harding等［2］分别宣 布发现一种新的蛋白质，这种蛋白可以和免疫抑制剂他克莫司(FK506)结合，故将其命名为FK506结合蛋白(FK506 binding protein，FKBP)［3］。它们在原核生物与真核生物细胞中广泛存在，是一类高度同源……