组织型纤溶酶原激活物在进展期大肠癌组织中的表达与微血管密度的相关性研究*

顾 敏，孟信春，王 强，杨清平

(1.重庆市长寿区中医院普外科 401220；2.重庆市长寿区人民医院普外科 401220；3.重庆市长寿区人民医院病理科 401220)

组织型纤溶酶原激活物(t-PA)由血管内皮细胞合成分泌，可以选择性激活与纤维蛋白结合的纤溶酶原而发挥纤溶作用，近年来发现t-PA能够通过激活细胞外基质中的蛋白质酶联反应来降解微血管基膜及细胞外基质，从而阻碍微血管的生成。国内多家研究数据显示癌组织中t-PA浓度明显低于正常组织。本文通过检测癌组织浸液中t-PA浓度及癌组织微血管密度(MVD)，初步探讨t-PA在肿瘤浸润转移过程中的调节机制。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2008年6月至2010年8月本院大肠癌患者手术切除的标本60例。患者术前检查未发现远处转移，术前未接受放化疗，无急性肠梗阻患者，经肠道准备后行标准大肠癌根治术。肉眼见肠管浆膜层、直肠系膜或邻近组织有浸润。病理证实癌组织浸润肠管全层，包括高中低分化腺癌及黏液腺癌。切取外缘癌组织为研究组，另取距肿瘤5 cm以上的正常肠管组织20例为对照组。

1.2方法 将外缘癌组织分为两等分，分别检测组织型纤溶酶原激活物及微血管密度。t-PA检测采用发色底物法，试剂购自上海太阳生物技术公司。将癌组织剪成细小碎块，按比例加入PBS液后研碎，获取组织匀浆，离心后取上清液检测。MVD检测采用免疫组化SP法，鼠抗人CD34单克隆抗体及试剂盒购自武汉博士德生物工程公司。每张切片在100低倍光镜下挑选微血管分布最密集区，然后在200高倍光镜下计算5个视野的微血管数目取平均值。……