姚红卫,吕丽丽
(1.江苏省常州市第四人民医院呼吸内科 213001;2.徐州医学院附属医院老年科,江苏徐州 221008)
气道重塑是哮喘的重要病理特征之一,目前国内外对气道重塑的研究多集中于平滑肌增生/肥大、基底膜增厚导致的气道壁增厚,对于血管生成等气道血管改变方面的研究尚较少。血管内皮细胞生长因子(VEGF)是一种有效的多功能的血管调节因子,它通过与血管内皮上的特异性受体结合,具有强大的促进内皮细胞增殖、增加微血管通透性、诱导血管生成等多种功能。本研究通过建立慢性哮喘小鼠模型,了解VEGF在哮喘小鼠模型肺组织中的表达和对气道血管生成的作用,以及早期应用地塞米松对气道重塑及VEGF表达的影响,现报道如下。
1.1材料 采用4~6周龄的BALB/c小鼠30只,雌性,体质量18~22 g(购自徐州医学院实验动物中心)。饲养条件为清洁级环境,室温为22~25 ℃,自由饮水无鸡卵清蛋白(OVA)进食。
1.2仪器与试剂 OVA(美国Sigma公司),小鼠VEGF ELISA检测试剂盒(深圳晶美公司),兔抗小鼠Ⅷ因子多克隆抗体和Enivision 试剂(即用型,丹麦Dako公司),VEGF 多克隆抗体及SABC免疫组化检测试剂盒(购自武汉博士德生物工程有限公司),奥林巴斯图像采集系统,402A型超声雾化器(江苏鱼跃医疗设备有限公司)。
1.3方法
1.3.1哮喘模型的制备和分组 将30只小鼠按随机数字表法分为3组,每组10只。生理盐水对照组(A组):以生理盐水代替OVA致敏和激发。哮喘组(B组):分别于第0、7、14及21天给小鼠腹腔注射OVA致敏液0.2 mL(含OVA 25 μg硫酸铝钾1 mg)在致敏后第28天,将小鼠置于一容器中(20 cm×40 cm×50 cm),每5只为1组,以2%的OVA溶液雾化激发,每天1次,每次30 min,连续7 d,然后再隔天1次共激发18次;……