HLA-B27阳性强直性脊柱炎患者淋巴细胞含量、DKK1和BMP-2因子表达研究

刘 华，董 青

(江苏省苏州市中医院检验科 215007)

强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是一种危害骨骼系统与自身免疫相关的慢性疾病，症状表现为关节部位疼痛，行动不便，严重者甚至丧失活动能力，病理实验显示为关节的纤维化和骨性强直，进一步研究表明该疾病与人类白细胞抗原MHC-Ⅰ类分子HLA-B27高度相关，HLA-B27阳性成为AS的诊断指标之一[1]。Dickkopf(DKK1)是一种含有2个富半胱氨酸区域的分泌性糖蛋白，参与抑制Wnt/β-catenin信号[2]，通过多种级联反应抑制成骨细胞，激活破骨细胞，破坏成骨与溶骨失衡。骨形成蛋白-2(bone morphogenetic protein,BMP-2)是一种生长因子，在体内、体外均有较强的骨诱导活性，可以使碱性磷酸酶的活性增高、骨桥蛋白、骨钙蛋白及1型胶原蛋白合成增加[3]。本研究通过流式细胞术检测淋巴细胞亚群在B27阳性患者和健康人之间的差别，通过酶联免疫反应检测DKK1和BMP-2在AS患者和健康人中的含量，探讨淋巴细胞亚群的结构与AS患病的关系，并进一步深入研究DKK1和BMP-2与AS疾病之间的关系，为研究AS疾病提供新的参考依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 随机抽取30例HLA-B27阴性健康受试者(对照组)，60例HLA-B27阳性住院患者(AS组)，符合AS诊断标准。所有受试者均于当天抽取外周静脉血2 mL，EDTA-2K抗凝，标本在6 h之内测定。

1.2仪器与试剂 流式细胞仪购自美国BD公司；酶标仪、洗板机购自芬兰雷勃公司；离心机购自德国艾本德公司；隔水式培养箱购自海门市恒昌仪器厂。CD3-FITC/CD8-PE/CD45-PerCP/CD4-APC(Cat NO:340499t)、CD3-FITC/CD16+56-PE/CD45-PerCP/CD19-APC(Cat NO:340500+)购自BD公司；人DKK1和BMP-2酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒购自上海沪尚生物科技有限公司。

1.3方法

1.3.1流式细胞仪标本处理……