c-FLIP及Caspase-8表达在乳腺癌组织中的表达及临床意义

潘 峥 陈 军 覃冠德 覃思繁

乳腺癌是严重危害女性健康的恶性肿瘤之一，近年来发病率呈明显上升趋势。细胞型Fas相关的死亡区域蛋白样白介素-1转换酶抑制蛋白(FADD-like interleukin-1β- converting enzyme inhibintory protein，c-FLIP)被认为是1种重要的细胞凋亡抑制蛋白，在结构上与Caspase-8相似，但无Caspase-8的蛋白水解活性。它与含死亡结构域的Fas相关蛋白(Fas associated death domain，FADD)结合，抑制Caspase-8活化，使Caspase-8介导的蛋白酶不能发生级联反应，从而阻断Fas介导的死亡受体途径的细胞凋亡[1]。我们应用免疫组化方法检测乳腺癌与癌旁组织中c-FLIP和Caspase-8表达的情况，探讨它们在人乳腺癌中的表达情况及其临床意义。

1 材料与方法

1.1 材料来源

收集2004年1月～2005年8月广西医科大学附属肿瘤医院手术切除的乳腺癌标本80例，年龄26～72岁，中位年龄43岁；患者术前均未进行任何抗癌治疗，所有病例随访5年。TNM分期:Ⅰ～Ⅱ期58例，Ⅲ期22例；组织学分级：Ⅰ～Ⅱ级43例，Ⅲ级37例。每例均取癌及对应癌旁肝组织(距肿瘤边缘2 cm)。

1.2 方法

免疫组织化学检查采用Envision两步法。c-FLIP浓缩型兔抗人多克隆抗体购自美国Neomarkers公司，Caspase-8浓缩型兔抗人多克隆抗体购自美国Labvision公司，抗体稀释浓度为1∶100。即用型快捷MaxvisionTM检测试剂盒购自福州迈新生物技术科技公司。整个过程按试剂盒说明书进行。每批染色均设已知阳性切片作阳性对照，用磷酸盐缓冲液(phosphatic buffered saline，PBS)代替一抗作阴性对照。

1.3 结果判断

c-FLIP及Caspase-8蛋白阳性信号均主要定位于细胞质，呈棕黄色颗粒为阳性细胞。由2位医师采用双盲法观察每张切片。阳性判断根据染色程度和免疫阳性细胞占肿瘤细胞总数百分比综合记分。……