玻璃化法优化保存川贝母组织培养物研究

王跃华，林抗雪，刘益丽，马良良，代 勇，徐世军，王晓蓉

(1.成都大学生物产业学院，四川成都 610106;2.成都恩威集团(投资)有限公司，四川成都 610041)

0 引言

1989年，Langis等首次报道了玻璃化法超低温保存的方法，其原理是将细胞或组织置于由一定比例的渗透性和非渗透性保护剂组成的玻璃化溶液中，在足够快的降温速度下，经高浓度玻璃化溶液作用后的组织细胞内外及其溶液因缺乏冰晶形成的条件而进入到无定型的玻璃化状态，并以这种玻璃化状态在低温下保存，此状态下由于没有冰晶对细胞的损伤，因而植物材料的存活率大大提高［1］.此方法免去了传统冷冻方法中复杂的程序性降温等步骤，具有设备简单、程序简化和冻存效果好等优点［2］.在利用玻璃化法保存植物材料的过程中，玻璃化溶液脱水处理时间的掌握以及对保存材料的选择是影响植物材料保存效果的关键因素.玻璃化脱水处理时间的长短将决定着保存材料是否充分脱水以及玻璃化溶液是否充满组织细胞间，进而影响材料的保存效果.由于植物的基因类型，抗冻性，以及器官、组织、细胞的生理状态等因素对超低温保存的效果有较大影响［3］.因此，在对植物进行超低温保存前，对保存材料的选择极其重要.本研究将玻璃化法首次应用于川贝母芽、愈伤组织和鳞茎的超低温保存中，以期找到最适宜于用玻璃化法保存的川贝母材料.

1 材料与方法

1.1 材料选择

实验材料来自成都……