高效液相色谱法测定复方蛇补酊剂中蛇床子素的含量*

高培平 苑振亭

(1.泰山医学院附属泰山医院，山东 泰安 271000； 2.中国人民解放军第230医院，辽宁 丹东 118000)

蛇床子系伞形科蛇床属植物蛇床[cnidium monnieri (L.) cuss]的果实[1],为常用中草药，蛇床子素(osthol)是从中药蛇床子中提取的主要有效成分之一[2]。蛇床子及其制剂在临床已应用多年，主要用于止痒[3-6]、治疗湿疹[7-9]等 。因此我们研制了复方蛇补酊剂用于治疗湿疹，采用HPLC法测定复方蛇补酊剂中蛇床子素的含量，现介绍如下。

1 仪器与试剂

高效液相色谱仪(HTTACHI L-7110)；超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；电子分析天平； T2000P色谱工作站； 蛇床子素对照品(中国药品生物制品检定所，批号：110822-200305)；其余试剂均为色谱纯、分析纯。

2 方 法

2.1色谱条件 色谱柱：Hypelsil C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相：甲醇-水(80︰20)；检测波长：320 nm；流速：1.0 ml·min-1；进样量:20 μl；理论塔板数按蛇床子素计算应不低于1000。在上述色谱条件下，蛇床子素与杂质峰分离良好。色谱图见图1。

2.2对照品溶液 精密称取蛇床子素对照品适量(相当于蛇床子素20 mg)，加流动相制成0.1 mg·ml-1的溶液备用。

2.3标准曲线的制备 精密量取对照品溶液用流动相稀释制成每1 ml中含1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 μg的标准品溶液，取20 μl进样测定。

图1 高效液相色谱图

A.蛇床子素对照品；B.供试品；C.空白对照(不含蛇床子)

3 结 果

3.1标准曲线的线性、最低检测量(LLOD)和最低定量限(LLOQ) 以浓度C对蛇床子素的峰面积A进行线性回归，得回归方程为A = 706242C+7632.3(r=0.9997)。结果表明，蛇床子素在1.0～5.0 μg·ml-1范围内，线性关系良好。最低检测量(LLOD)和最低定量限(LLOQ)分别是0.2 μg·ml-1和1 μg·ml-1。

3.2回收率与精密度试验 精密量取对照品溶液适量，分别制成浓度为1.0，3.0，5.0 μg·ml-1的样品溶液，取20 μl进样测定，结果见表1。

表1 回收率和精密度试验结果(n = 6)

3.3稳定性试验 取“3.2”项下3.0 μg·ml-1溶液，室温放置12 h，分别在0，2，4，6，8，12 h进样20 μl，测定蛇床子素峰面积,RSD为1.36%(n=6)，表明该供试品溶液在12 h内稳定。

3.4样品测定 精密量取复方蛇补酊剂适量(约含蛇床子素20 mg)，用流动相定量稀释制成约含2 μg·ml-1的溶液，摇匀；同法制备蛇床子素对照品溶液，取20 μl注入高液相色谱仪，结果见表2。

表2 样品含量测定结果(n=3)

采用HLPC法测定蛇床子素的含量已有报道[10-11]，本实验采用HPLC方法测定了复方蛇补酊剂中蛇床子素的含量，方法准确可靠，操作简单可行，其它组分不干扰蛇床子素的含量测定，可用于复方蛇补酊剂中蛇床子素的含量测定。

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