陈昊,巩文词,陈江,冯娟,吕艳,朱珊丽,陈向敏,薛向阳,张丽芳
(温州医学院 微生物学与免疫学教研室、分子病毒与免疫研究所,浙江 温州 325035)
沙眼衣原体主要外膜蛋白多表位免疫血清中和活性分析
陈昊,巩文词,陈江,冯娟,吕艳,朱珊丽,陈向敏,薛向阳,张丽芳
(温州医学院 微生物学与免疫学教研室、分子病毒与免疫研究所,浙江 温州 325035)
目的:制备高效价E型沙眼衣原体(Ct)主要外膜蛋白(MOMP)168多表位特异性免疫血清并研究其免疫学特性。方法:纯化的Trx-his/CtMOMP168融合蛋白经弗氏佐剂乳化后,小鼠背部皮下多点免疫注射,间隔2周后加强免疫,共3次,并分别于免疫前和每次免疫后2周取血,采用ELISA法检测血清融合蛋白和E型Ct全菌体特异性抗体水平及变化趋势,通过体外中和反应检测多表位特异性血清的免疫学特性。结果:小鼠用CtMOMP168多表位融合蛋白全程免疫后产生了抗融合蛋白和E型Ct全菌体特异性抗体,ELISA法检测最高滴度达1:500。ELISA和体外中和实验检测结果显示,该抗体能特异性识别MOMP多表位蛋白和E型Ct全菌体,并能有效抑制E型Ct感染Hela229细胞。结论:沙眼衣原体MOMP多表位融合蛋白免疫血清可特异性结合并中和E型Ct。
沙眼衣原体;主要外膜蛋白;表位;中和作用
沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)是性传播疾病的主要病原体之一,感染普遍,且可增加HIV的感染概率,与宫颈癌的发生密切相关[1-3],同时,Ct感染经抗生素治疗后易复发,给Ct的防治带来了困难,而疫苗研制是防治Ct感染的主要途径之一。Ct的主要外膜蛋白(major outer membrane protein,MOMP)占其总外膜蛋白量的60%,可诱导机体产生细胞免疫及包括中和抗体的体液免疫[4],因而是研究Ct疫苗的主要靶抗原。……