加味归脾汤对乳腺癌MDA-MB-435株抑制作用的研究＊

李晶哲，夏 芸，马琰岩，刘 红，吕俊海，刘柏东

(1.中国中医科学院医学实验中心，北京 100700;2.赛诺菲安万特(中国)公司，北京 100022)

乳腺癌是威胁妇女健康的主要恶性肿瘤，居女性易发恶性肿瘤之首。目前有许多方法如新药泰索帝、赫赛汀等和放射疗法促进癌细胞凋亡、抑制癌细胞转移等，帮助人类提高乳腺癌患者的生存率，但是放射和化学疗法带来的巨大副作用使许多患者难以承受，并丧失了治疗的机会。尤其对于雌激素受体(estrogen receptor，ER)阴性的乳腺癌患者，因为其高浸润性的特性且靶向ER药物无效，往往预后更差。中医认为，乳腺癌的主要病因和发病机制在于肝气郁结、冲任失调、毒热蕴结、气血两虚。中医治疗乳腺癌的原则主要为疏肝解郁、调补冲任、清热解毒、益气养血、健脾和胃等[1]。本文选用中药方剂为具有补气升阳、益卫固表等功效的加味归脾汤(《景岳全书》记载)，细胞为ER受体阴性的代表株MDA-MB-435株。以此对乳腺癌ER受体阴性的中医治疗做一研究，以明确该方剂对ER受体阴性乳腺癌产生的生物学作用。为便于今后发挥中药联合用药的优势，进一步研制出针对ER受体阴性乳腺癌有显著作用的新药。本文使用目前治疗乳腺癌的一线药物多西紫杉醇(Docetaxel)为阳性对照药，该药物主要作用于微管蛋白/微管系统，能促进微管聚合，使细胞分裂阻滞于G2/M期，最终导致细胞死亡。

1 材料

1.1 细胞株

人乳腺癌细胞株MDA-MB-435(ATCC)。

1.2 药品与试剂

加味归脾汤原料药(同仁堂);Docetaxel(Sanofi-Aventis);MTS(CellTiter 96RAQueous，Promega);细胞凋亡流式细胞检测试剂盒(BD);Caspase-8检测试剂盒(Promega);DMEM(GIBCO);胎牛血清(Hyclone)、细胞消化液(GIBCO)。……