乳酸杆菌对老龄小鼠T细胞膜型CD28和血清中可溶性CD28表达的影响

洪 亮 陈其御 王 萍 沈 强 (皖南医学院微生物与免疫教研室，安徽 芜湖 24002)

1995年德国科学家Graham Pawelec小组研究发现，T细胞表面与老化关系最密切的抗原分子是CD28分子。到目前为止，人们已经基本公认CD28分子成为免疫老化的重要标志之一，其在人类CD8+T细胞和CD4+T细胞表面随增龄而表达降低的证据可见于最近的一些报道中。CD28分子是表达在人类95%CD4+T细胞表面和50%CD8+T细胞表面的重要信号分子，主要参与T细胞的活化、增殖、分化及发挥免疫应答作用。其中外周血T细胞膜型CD28(mCD28)和血清中可溶性CD28(sCD28)的表达随年龄的改变而不同。那么，益生菌是否通过改变CD28分子的数量和质量来达到抗衰老的目的呢?本文就乳酸杆菌对老龄小鼠T细胞mCD28的表达水平和血清中sCD28的含量进行定量分析，进一步在分子水平探讨乳酸杆菌在抗衰老中的意义和作用，为免疫衰老机制提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 培养菌株 分别取冻干保存的Ⅱ型嗜酸乳酸杆菌株在MRS肉汤中复苏增菌，并在固体培养基中接种生长，实验时将培养于固体培养基中的菌苔用PBS洗涤三次，并用麦氏比浊法调各乳酸杆菌浓度至1×1010cfu/ml浓度悬液备用。

1.2 选择试验动物 选取老龄KM小鼠(13～15月龄)80只，雌雄各半，饲养于普通环境中。其中每组再各随机分为两组，一组为试验组，另一组为对照组，每组20只。试验组每天每只老鼠腹腔注射乳酸杆菌0.2 ml/只，对照组每天每只老鼠腹腔注射生理盐水0.2 ml/只，连续10 d。

1.3 标本采集 第11天处死小鼠，每只分别收集肝素抗凝及不抗凝的老龄小鼠外周血2 ml，抗凝血经分离获得单个核细胞，间接免疫荧光及流式细胞仪分析老龄小鼠T细胞mCD28的表达水平，ELISA检测血清中sCD28的含量。……