瑞舒伐他汀钙通过下调血管内皮生长因子的表达抑制斑马鱼血管发育

吕 慧，王国坤，刘 博，李松华，秦永文（第二军医大学长海医院心血管内科，上海200433）

经皮冠状动脉介入术（percutaneous coronary intervention，PCI）对心绞痛及心肌梗死的再血管化治疗具有重要作用，但术后支架内再狭窄（in－stent restenosis，ISR）一度成为支架植入的障碍。曾有文献报道可明显减少ISR的药物洗脱支架的再狭窄率在糖尿病病人中高达20.9%，即使在非糖尿病病人中也达到14.6%［1］。他汀类药物可抑制人体胆固醇生物合成，在心血管疾病中广泛应用于治疗高胆固醇血症，发挥稳定斑块、抗炎等作用。既往已有研究表明，他汀类药物可明显减少PCI后再狭窄率的发生［2］，而内皮细胞的活化及血管新生在ISR的病理生理过程中发挥了重要作用［3］，推测他汀类药物可能影响血管新生过程发挥心血管保护作用。

为能实时活体观察他汀类药物对血管新生的影响，作者使用转基因斑马鱼作为实验对象。通过研究瑞舒伐他汀钙对斑马鱼血管发育的影响，间接揭示他汀类药物影响血脂之外的作用，为血管新生相关PCI后再狭窄的治疗提供新的参考。

1 材料和方法

1.1 材料和仪器 动物模型为转基因斑马鱼Tg（flk1：EGFP），系中国科学院上海生命科学研究院馈赠；Trizol试剂（美国Invitrogen公司）；PrimeScript RT试剂盒（日本Takara公司）；雷鸟定量PCR试剂（日本Toyobo公司）；体视荧光显微镜（德国莱卡仪器有限公司）。瑞舒伐他汀钙片（10mg／片，批号113651，阿斯利康制药公司）。

1.2 药物溶液制备 根据Westerfield［4］方案配制鱼卵水（egg water，137mmol／L NaCl，5.4mmol／L KCl，0.13mmol／L CaCl2，0.1mmol／L Mg2＋，pH 7.2），将瑞舒伐他汀钙片研磨成粉后溶入二甲亚砜（DMSO）终浓度为0.5%的鱼卵水中，药物浓度梯度为0.01、0.02、0.04、0.08、0.10nmol／L。

1.3 胚胎处理 根据Westerfield［4］方案饲养，28.5℃下照明14h／黑暗10h为一个周期，饲养水连续充氧气，水为半自动更新，定时给予饲料草履虫。……