刘彩霞 乔增培 杨锦红 李向阳
鲍曼不动杆菌(acinetobacter baumannii,AB)作为条件致病菌,广泛分布于自然界。近年来,因其在医院内感染中的分离率和泛耐药菌株的迅速增多而引起广泛关注。2007年Smith等[1]通过直接测序,运用比较基因组学的方法发现,AB基因组中含有许多外来基因岛,除了一些插入元件和耐药基因外,还包括一些毒力基因;他们还通过插入突变的方法获得了一株无毒力的鲍曼不动杆菌。那么各种耐药基因盒的随机插入,是否引起临床上不同耐药表型AB致病力的改变呢?本实验拟通过对全敏感和泛耐药两组AB对Hep-2细胞的黏附及致其病变情况的观察,分析两组AB之间黏附定植及诱导细胞凋亡能力上的差异。
1.菌株基本情况:(1)鉴定与药敏:40株AB均采用Walk-Away 96SI全自动微生物鉴定/药敏系统进行鉴定及药敏。所测抗菌药物包括:头孢噻肟、头孢他啶、氨苄西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸、哌拉西林、替卡西林/克拉维酸、头孢吡肟、阿米卡星、庆大霉素、环丙沙星、亚胺培南、复方新诺明、妥布霉素、左旋氧氟沙星、头孢曲松、氨曲南和头孢哌酮/舒巴坦。(2)菌株分布:20株泛耐药菌株均分离自成人ICU患者的痰液标本,20株全敏感菌株分离自新生儿、儿童留观室、儿童感染科和儿童呼吸科患者的痰液标本。泛耐药菌株为对上述17种药物均耐药,全敏感菌株则对上述17种药物均敏感。
2.细胞培养及相关试剂:Hep-2细胞株购自上海细胞库,RPMI1640培养基按GIBCO的说明书配制,小牛血清购自杭州四季青生物工程材料有限公司,0.25%的胰酶、细胞培养瓶和培养板均购自吉泰生物医药技术有限公司,凋亡DNA Ladder提取试剂盒购自上海超研生物科技有限公司。……