黄河三角洲地区PRRSV的分离鉴定及ORF4、ORF5基因遗传特性分析

吴忆春

（山东滨州职业学院生物工程学院，山东滨州256603）

黄河三角洲地区PRRSV的分离鉴定及ORF4、ORF5基因遗传特性分析

吴忆春

（山东滨州职业学院生物工程学院，山东滨州256603）

采集黄河三角洲地区某猪场发生高热症死亡的仔猪病料，处理后接种Marc－145细胞，传代2代以后出现明显细胞病变，其病毒TCID50为10－4．625／m L，采用PCR检测细胞培养物中伪狂犬病病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒，均为阴性。采用第2代细胞培养物人工感染仔猪，仔猪出现高热、咳嗽、发绀、耳朵发紫、死亡等临床表现，剖检发病猪可见明显的间质性肺炎表现，采集肺、脾、肾和淋巴结等组织进行PCR检验，均能检测到PRRSV，初步认为分离到一株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒，命名为HSJ－1102株。对该分离株ORF4、ORF5基因进行扩增与克隆测序，序列分析表明，该分离株ORF4基因序列与JXA1、Ch1－a等毒株的同源性较高，在97．4%～99．3%之间，与VR2332等毒株同源性低于90%；分离株ORF5基因序列与JXA1等毒株同源性为97%～99．8%，与Ch1－a，VR2332等毒株同源性较低，分别为92．5%和86．4%。

猪繁殖与呼吸综合征病毒；分离鉴定；ORF4；ORF5

自1989年首次报道猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）病例以来，PRRS已经成为影响养猪业的重庆疫病，在全世界范围内造成巨大经济损失［1］。目前，现有疫苗尚不能完全有效地控制所有或大部分猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）流行毒株，这与病毒的高变异性、病毒对宿主先天免疫反应的潜在影响、猪个体免疫反应的差异性等多方面因素有关。20多年来，人们对PRRSV的感染方式、致病机制与免疫预防进行了不懈的研究，但由于PRRSV的高变异性等原因，研究过程中仍然存在着大量的难题［2－3］。……