大孔树脂分离纯化青钱柳总黄酮的工艺研究

郦红岩，陈 建，赵 雷

江苏吉贝尔药业有限公司，镇江 212009

青钱柳[Cyclocarya paliurus（Batal.）Iljin.]广泛分布于江西、浙江、江苏、安徽、福建等地，是我国特有的速生树种。动物实验和临床研究表明，青钱柳有降血压、降血糖、降血脂、增强免疫力的功效，是一种值得开发的天然资源[1]。青钱柳中具有丰富的黄酮类化合物，如槲皮素、山奈酚、山奈酚-7-O-α-L-鼠李糖、山奈酚-4′-甲醚-7-O-β-D-甘露糖[2]、儿茶素、南酸枣乔松素-7-O-吡喃葡萄糖苷[3]等。研究表明，青钱柳黄酮是α-葡萄糖苷酶抑制剂，有很强的抑制活性，能显著降低糖尿病小鼠空腹血糖[4]。

目前有大量的文献报道证实，大孔树脂对于黄酮类物质的纯化精制具有良好的效果，已被成功用于多种中草药中黄酮类物质的分离纯化[5]。本研究采用水提、大孔树脂吸附、解吸来纯化青钱柳中总黄酮，为青钱柳的深度开发提供参考。

1 仪器、原料与试药

岛津UV-2550紫外分光光度仪；CP225D电子天平（德国赛多利斯）。

芦丁对照品（中国药品生物制品检定所，批号：100080-200707）；HPD722、HPD100、D101、HPD400、HPD600、HPD427大孔树脂 （购自沧州宝恩吸附树脂材料科技有限公司）。试剂为分析醇；水为蒸馏水。

青钱柳购自福建龙岩地区，经江苏大学欧阳臻教授鉴定确认为青钱柳（样品标本存放于本公司）。

2 总黄酮测定

2.1 溶液制备

2.1.1 对照品溶液的制备 精密称取在120℃干燥至恒重的芦丁对照品0.2 g，精密称定，置100 mL量瓶中，加95%乙醇70 mL，超声使溶解，加乙醇至刻度，摇匀，精密量取10 mL，置100 mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得（每1 mL中含无水芦丁0.2 g）。

2.1.2 供试品溶液的制备 精密量取洗脱液25 mL，置50 mL量瓶中，加5%亚硝酸钠溶液1 mL，混匀，放置6 min，加10%硝酸铝溶液1 mL，摇匀，放置6 min，加氢氧化钠试液10 mL，再加水至刻度，摇匀，放置15 min，过滤，在500 nm波长处测定吸光度。……