丝裂霉素C对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响

吴晓明，孙 奎，张红霞，许新华，孙喜平，杨景哲

(承德医学院附属医院，河北承德067000)

增生性瘢痕是皮肤损伤后成纤维细胞(FB)增殖的结果，FB是合成、分泌大量胶原蛋白及其他细胞外基质，而且是多种生长因子的产生者，它的过度增生及功能的亢进是病理性瘢痕发生、发展的基础。在增生性瘢痕组织中及体外培养的增生性瘢痕FB中均发现了细胞增殖调控及细胞程序性死亡方面的异常。2010年1～12月，本研究旨在探讨丝裂霉素C(MMC)对增生性瘢痕FB增殖的影响及机制，为增生性瘢痕的治疗提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 标本来源 选取承德医学院附属医院烧伤整形外科手术治疗的患者，增生性瘢痕患者无明显创伤史，且增生性瘢痕都处于增生期，均经临床和病理确诊。10例瘢痕增生标本，其中男7例、女3例;部位分布:胸部6例，肩部2例，耳垂部1例，背部1例。

1.2 FB培养 将手术切下的增生性瘢痕组织采用组织块贴壁培养法进行体外培养。在无菌条件下切除表皮及皮下脂肪，将标本制成1 mm3左右的组织块，置于培养瓶中，在95%空气、5%CO2、37℃、饱和湿度条件下培养8～12 h。然后加入适量含15%胎牛血清的DMEM培养液，继续培养，3～4 d换液1次，2～3周后，原代细胞生长成单层，用0.25%胰蛋白酶消化后，按1∶3的比例传代培养。

1.3 MTT法测定FB细胞的增殖 取对数生长期的增生性瘢痕FB，用2.5 g/L胰酶消化，调整细胞密度至2×104/mL，接种于3块96孔培养板，每孔100 μL。常规培养FB 24 h后，吸去培养液和未贴壁细胞，更换含不同药物浓度的培养液。实验分组:正常对照组，用DMEM培养液;MMC干预组，终末浓度分别为2.5、12.5、50、100、200 μg/mL。……