孙浩,刘寅,于静,贺新生,何培新
(1.郑州轻工业学院食品与生物工程学院,河南郑州450002;2.西南科技大学生物科学与工程学院,四川绵阳621002)
红缘拟层孔菌Fomitopsis pinicola(Swartz.:Fr.)Karst.,异名红缘层孔菌Fomes pinicola(Sw.:Fr.)Cke.、红缘多孔菌,是针叶树原木上常见的木材腐朽菌,隶属于担子菌纲Basidiomycetes、非褶菌目Aphyllophorales、多孔菌科Polyporaceae、拟层孔菌属Fomitopsis[1-3].现代药理学研究证明,该菌子实体提取物具有抗菌、调节中枢神经系统、降血糖、调节人体免疫以及抗氧化和清除游离基的作用[4],而菌丝体的相关研究报道较少.本研究初步优化了红缘拟层孔菌的液体发酵条件,并定性分析了菌丝体主要化学成分,为该菌的进一步开发利用奠定基础.
红缘拟层孔菌分离于四川省绵阳市树木发生的野生子实体标本.菌种保藏于郑州轻工业学院微生物学实验室.
1.2.1 PDA加富培养基土豆250 g,葡萄糖10 g,蛋白胨2 g,KH2PO41 g,MgSO40.5 g,琼脂20 g,自来水1000 mL,pH自然.用于菌种活化和菌种保藏.
1.2.2 摇瓶种子培养基PDA加富培养基不用琼脂,250 mL三角瓶分装80 mL培养基,透气塞封口.用于种子培养和适宜pH测定.
1.2.3 碳源和氮源测定基础培养基土豆250 g,碳源20 g,氮源2 g,KH2PO41 g,MgSO40.5 g,自来水1000 mL,
pH自然.每250 mL三角瓶分装80 mL培养基,透气塞封口.
1.3.1 种子液制备冰箱保存的菌种转接PDA加富培养基斜面,25℃培养10 d.取活化菌种1 cm2左右接种摇瓶种子培养基,25℃150 r/min振荡培养6 d,液体培养物加入无菌磁棒和玻璃珠,磁力搅拌2 h,得到的菌丝悬浮液作为种子使用.
1.3.2 菌丝生长适宜碳源测定以不加碳源的基础培养基为对照,氮源采用0.2%蛋白胨(w/v,下同),选……