吖啶红-罗丹明B体系光度法测定马蹄皮提取物清除羟自由基作用*

张晓鹤，谢 红，张泗达，柳 维，林庆宇

（1.四川大学，四川 成都 610064；2.贺州学院，广西 贺州542800）

人体在各种生命活动的氧化代谢过程中不断产生大量自由基，而自由基的过氧化反应可导致细胞生理的诸多病理变化，如引发炎症，损伤膜结构及功能，引发器官癌变等[1]。羟自由基（OH·）是最活泼的活性氧自由基之一，更容易加速细胞衰老，严重危害身体健康。利用安全、无毒的天然抗氧化剂可以清除活性自由基[2-4]，因此，探寻快速的对自由基清除作用有识别能力的检测方法对于离体筛选抗氧化剂，并进一步研究自由基的生物作用具有重要意义。检测自由基最常利用的是有色染料褪色光度法[5]，该法操作简便，仪器简单，成本低。但由于Fenton反应产生的羟自由基本身存在着不稳定性[6]，导致采用单一染料的褪色光度法普遍存在灵敏度不高，结果重现性差的缺点[7，8]。因此，研究高灵敏和高稳定性的测定天然成分抗氧化能力的新体系对于天然抗氧化物的研究有重要意义。

本文研究发现，酸性介质中，Fenton反应产生的羟自由基能迅速氧化吖啶红-罗丹明B混合染料使其褪色，通过监测吸光度值的变化，研究体系对自由基捕捉的能力，最后对不同溶剂马蹄皮提取物的抗氧化能力进行了筛选。

1 实验部分

1.1 仪器与主要试剂

723型分光光度计（上海精密仪器厂）；pHS-2C型精密酸度计（上海雷磁）；501型恒温器（江苏实验仪器厂）；旋转蒸发仪（上海亚荣）。

1.2×10-5mol·L-1吖啶红（Acridine Red） 水溶液；4.8×10-5mol·L-1罗丹明 B（Rhodamine B）水溶液；5.0×10-3mol·L-1十二烷基苯磺酸钠（DBS）水溶液；……