116个小麦品种（系）抗叶锈基因Lr9－Lr26、Lr19－Lr20的复合PCR检测

任晓利， 刘太国， 刘 博， 高 利， 陈万权

（中国农业科学院植物保护研究所，植物病虫害生物学国家重点实验室，北京 100193）

小麦叶锈病是影响小麦产量和品质的主要病害之一，在世界各小麦种植区域均有分布。我国小麦叶锈病以西南、长江流域麦区发生较重，华北、东北麦区曾造成严重损失，成为生产上一个重要问题［1－2］。筛选和培育抗病品种是防治小麦叶锈病最为经济、安全和有效的方法。然而，由于抗叶锈品种的单一化种植和小麦叶锈菌新毒性的产生，经常导致品种抗锈性的“丧失”。因此，深入研究小麦叶锈病抗源及抗性基因是抗病育种的基础［3］。

截至2010年，小麦中已发现近100多个抗叶锈基因，其中72个被正式命名，67个被定位，39个抗病基因被标记［4］。来源于黑麦的Lr26与抗条锈基因Yr 9、抗秆锈基因Sr31、抗白粉基因Pm8连锁，广泛用于我国小麦抗病育种中，该基因与其他抗性基因复合存在可提高抗病性［5］。Lr20发现于普通小麦中，定位于染色体7 AL上，是抗白粉病基因Pm1和抗秆锈病基因Sr15基因簇的一部分。Lr20低温下对温度反应不敏感，表现有效的抗叶锈性，但当温度高于30．5℃时，完全失去抗锈作用［5］。Lr9 和Lr 19至今在我国表现很好的抗叶锈性，仍是有效的抗叶锈基因，在生产上有很大的利用价值［6］。

Lr9［7－8］、Lr19［9－10］、Lr20［11］、Lr26［12－14］等 17 个 抗叶锈病基因的RFLP、RAPD、AFLP标记已转化为稳定简便的STS（sequence tagged site，STS）、SCAR（sequence characterized amplified regions，SCAR）等标记，可以应用于分子辅助鉴定，为基因检测开辟了简捷可靠的途径。1988年Chamberian［15］等率先提出了多重PCR（multiplex poly merase chain reaction，MPCR）检测技术，即在同一反应体系中加入一对以上的引物，针对几个靶位点同时进行特异性扩增的PCR快速检测技术［16］。……