吴正升, 吴 强
(安徽医科大学病理学教研室,安徽合肥230032)
肿瘤的侵袭和转移是其难以根治和患者死亡的主要原因。肿瘤侵袭转移是一个复杂的和多步骤的过程,很多因子参与了这一过程。近年来,研究发现微小RNA(microRNA,miRNA)也参与了多种恶性肿瘤的发生和发展过程,它们通过调控其靶基因的表达在细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭和转移等很多过程中发挥了重要作用[1-3]。本课题组前期通过miRNA芯片检测了不同侵袭活性的人乳腺上皮细胞株的miRNA表达谱,发现很多miRNA出现了显著的差异性表达,可能与乳腺细胞侵袭活性有一定的关系[4-5]。在这些差异性表达的miRNA中包括了miR-183,其表达在高侵袭乳腺癌细胞MDA-MB-231和MDA-MB-468中较低侵袭细胞MCF-7和HBL-100显著下调。在本研究中,我们将首先使用实时定量PCR方法验证前期芯片中miR-183的表达结果,同时进一步检测临床人乳腺癌和良性病变组织中miR-183表达。然后,我们将在体外以乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞为模型,使用miRNA转染技术,分析miR-183对乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移活性的影响,试图为认识乳腺癌的侵袭和转移提高新的理论线索。
1.1 细胞株和病人材料 人乳腺上皮细胞系HBL-100,人乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231和MDA-MB-468均购自美国典藏细胞库(ATCC);收集安徽医科大学第一附属医院2009年7月~2010年6月间乳腺病例29例,其中乳腺癌18例,乳腺良性病变(纤维腺瘤和/或腺病)11例,患者均为女性,所有患者术前未做化疗、免疫或放射等抗肿瘤治疗。所有新鲜组织切除后快速置于液氮速冻后储存于-70℃,直到RNA的抽提。……