富勒烯的化学修饰技术及其修饰产物在疾病预报中的应用

李园园，李志明，郑志勇



富勒烯的化学修饰技术及其修饰产物在疾病预报中的应用

李园园1，李志明2*，郑志勇2

（1.漳州科技职业学院，福建 漳州 363202；2.漳州职业技术学院，福建 漳州 363000）

开发了N ,N -二乙基苯胺(DEA)-富勒醇(F)-异硫氰酸荧光素（FITC）磷光标记试剂(DEA-F-FITC)及建立DEA-F-FITC标记伴刀豆凝集素(Con A)亲和吸附(AA)固体基质室温燐光法(AA-SS-RTP)测定AFP-V新方法。该方法的灵敏度高(Pg/mL)为0.13(F)和 0.090(FITC)，用于测定人血清样品中AFP-V的含量和人体疾病预报，结果都与酶联免疫法的相吻合。

富勒烯；化学修饰技术；应用

1 引言

肝癌(HCC)是人体最常见的恶性疾病之一。当前HCC的诊断有化学免疫法[1],荧光诊断法[2], 磁性共振法[3], 三维投影放射性疗法[4]等。遗憾的是上述诊断的方法仅处于定性、半定量水平。研究表明，AFP-V含量与原发性肝癌密切相关。Sato 等报道[5]，AFP-V升高的肝硬化病人大多数在3～18个月内被诊断为肝癌患者。AFP-V预测HCC发生的正确率为94%[6]。国内外测AFP-V含量的方法有亲和电泳酶免疫法(LD =1.0×10–9ng/mL)[7]、亲和吸附 (LD =9.0×10–10 g/mL)法[8]、时间分辨荧光免疫法(竞争法的LD = 9.4 ×10–10 g/mL，夹心法的LD =3.0×10–10 g/mL)[9]、抗体亲和印迹法(LD< 4.0×10–7g/mL)[10]等。但诸类方法或是操作繁杂、费时、灵敏度不高, 难以满足生物试样中低含量AFP-V测定。显然，探索高灵敏、准确测定AFP-V的新方法与预报HCC，在生命科学领域具有重要学术价值和应用前景。

凝集素、糖、糖链结构的研究已成为当前生物医学领域中的热点和前沿课题。近年来，凝集素作为一种糖基探针，已用于糖蛋白、糖脂、糖结构及碱性磷酸酶研究[11-12]。因此，寻找凝集素的高效标记试剂，已成为生物分析的关键。文献报道了C50Cl10等富勒烯衍生物本身具有一定的发光特性。Caspar和Wang[13]曾用N ,N -二乙基苯胺(DEA)修饰C60，使其荧光大大增强。此研究测量的虽然是荧光信号, 显然其原理对磷光亦是适合的。

实验研究发现，DEA对F、FITC在ACM上发射的室温燐光(RTP)信号有显著的增强作用。……