禽流感、新城疫血凝抑制试验影响因素分析

蒋作强 贵池区动物疫病预防与控制中心 247000

车跃光 宿州市动物疫病预防与控制中心 234000

血凝试验(HA)和血凝抑制试验(HI)由于能同时进行大量样本分析,且因为具有试验过程易于操作以及结果快速、准确等特点而成为我国各地动物防疫监督机构和养殖场进行流行病学调查、免疫程序制定及免疫效果监测等的主要手段之一。尽管此监测方法操作简便、快捷、准确和实用,但是在实践中由于某些因素的影响,也易导致试验结果不准确,甚至无法判定。笔者根据多年的实践操作将实验中的影响因素浅析如下。

1 血凝试验(HA)和血凝抑制试验(HI)中常见问题。

1.1 对照孔凝集。

1.2 全部凝集。

1.3 红细胞全部下沉。

1.4 标准阳性对照血清的抗体效价与原结果误差大于1个滴度。

1.5 泪滴状流淌(完全血凝抑制)线细。

1.6 结果出现慢或结果出现快，并且整板无凝集现象。

1.7 凝集板出现跳孔现象。

1.8 凝集不明显，无法判定结果。

2 问题产生的可能原因及应对措施

2.1 样品方面

2.1.1 被检血清腐败变性。血样采集后要马上分离血清，分离后及时测定或放置在4℃冰箱内保存，力求新鲜。

2.1.2 受部分禽类血清中非特异性血凝抑制因子影响，尤其是水禽血清在做禽流感血凝抑制试验时会出现对照孔和对照孔后2～3孔有凝集现象。因此，在利用血凝抑制试验进行血清抗体测定之前，有必要对血清中非特异性因子进行排除。

2.2 试剂器材方面

2.2.1 缓冲液配制时间过长，pH值发生变化，使凝集不明显。缓冲液（PBS）尽可能现配现用，浓度和酸碱度要准确，可用HCL和NAOH液调节酸碱度，并用pH试纸测试到pH值合适为止。……