2-甲氧雌二醇对HL60白血病细胞凋亡的影响

陈琦 汤一榕 陈仁利 陈康银

随着医学的进步与发展，5年来白血病的生存率越来越高，但仍有部分白血病患者经过正规的化疗治疗后不能得到完全缓解，也有部分患者缓解后再次出现复发，故如何降低急性白血病的复发率和提高急性白血病患者的生存率是我们研究的关键，国内研究较少，这也是临床需要解决的问题[1-2]。

2-甲氧雌二醇（2-ME2）具有选择性的杀伤肿瘤细胞，对正常细胞的杀伤性较小的特点，这一优点受到医务人员的青睐。并且有研究报道，它能在体外抑制各种组织来源的肿瘤细胞进行增殖，减少肿瘤细胞数量，为白血病的治疗提供具有价值意义的资料[3]。

1 材料与方法

1.1 材料 于Sigma公司购买2-ME2，CCK8试剂盒（C0038，碧云天生物技术研究所）和Annexin V试剂盒（KGA101，南京凯基生物科技发展有限公司）购买于凯基生物公司，流式细胞仪（Guava，北京昊诺斯科技有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养 根据所接种的试剂不同分为2组，实验组：将不同浓度的2-ME2（10、30、50μmol/L）和HL60（购买于中科院 ）于37.0℃的温育箱中分别培养24、48和72h，并且分别接种3个孔，另起一排再接种3个孔。对照组：第一排和第二排不加2-ME2。

1.2.2 流式细胞术检测 不同浓度的2-ME2分别培养24、48和72h后，按照Annexin V试剂盒的操作说明，离心收集悬浮细胞，去除培养基，用冷PBS洗涤细胞2次，并在细胞悬浮液中加入5μL Annexin V-FITC，冷藏避光保存15min。再用流式细胞仪检测细胞，计算细胞凋亡百分率。

收集第2排细胞，制成悬浮液，每孔加入10μL CCK8，在培养箱中孵育4h后使用酶标仪在450nm检测吸光值，再使用37.0℃培养箱收集细胞，用PBS洗涤2次，5μL Annexin V-FITC，冷藏避光保存15min。……