异氟醚麻醉对老年大鼠海马微管相关蛋白tau剪切的影响

张晓光 薛张纲 仓静

（复旦大学附属中山医院麻醉科，上海 200032）

吸入麻醉药可加重阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）的神经病理改变。AD的神经病理特征为神经细胞外以β淀粉样蛋白（amyloidβ，Aβ）沉积为核心形成斑块，神经细胞内以过磷酸化的微管相关蛋白tau为核心形成神经纤维缠结（neurofibrillary tangle，NFT）和神经细胞丢失。有研究［1］显示异常剪切的tau蛋白也是NFT的成分之一［1］。异氟醚可以促进γ分泌酶的作用，增加Aβ的表达，促进Aβ寡聚化，增加Aβ的细胞毒性［2］；它还可以活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase－3），诱发神经细胞凋亡，使β淀粉样蛋白前体蛋白（amyloidβ precursor protein，APP）分裂酶和γ分泌酶的含量增加，并促进Aβ的表达［3］。但目前尚无报道表明异氟醚是否可以促进tau蛋白的剪切。Tau－C3是tau蛋白在D421位点被剪切后产生的片段。本研究旨在探讨异氟醚麻醉对Sprague Dawley（SD）老年大鼠海马Tau－C3含量的影响及其可能机制。

1 资料与方法

1.1 实验动物处理 将16只Sprague Dawley（SD）老年大鼠（＞18个月）随机分为对照组（n＝8）和麻醉组（n＝8）。将麻醉组大鼠置于气密性良好有机玻璃麻醉箱中，进气口与麻醉机呼吸回路相连，出气口与麻醉气体监测仪连接以监测麻醉箱内异氟醚、O2及CO2的浓度。载气中O2浓度为40%，新鲜气体流量为2L／min。当气体监测仪上显示异氟醚浓度达到1.5%时开始计时，使呼气末异氟醚浓度维持在1.5%～2%，异氟醚吸入时间为6h。对照组吸入气体中不含异氟醚，其他条件与麻醉组相同。观察大鼠的呼吸频率、幅度以及皮肤粘膜颜色。监测肛温，将麻醉箱置于水浴中，使大鼠肛温维持在35.5～36.5℃。

1.2 免疫组化多重标记 用8%水合氯醛腹腔……