流式细胞仪计数造血干细胞的影响因素

苏炳男，彭明婷

(北京协和医学院研究生院 卫生部北京医院 卫生部临床检验中心，北京 100730)

造血干细胞移植因其操作简便，能快速重建造血和肿瘤细胞污染发生较少等优点，已被广泛用于治疗多种恶性血液系统疾病、实体肿瘤、遗传性疾病、重症联合免疫缺陷病等顽疾[1]。移植物中和患者体内的造血干细胞数量对造血干细胞移植有重要的临床意义，如决定造血干细胞的最佳采集时机、评判采集效果以及预测移植成功率等[2,3]。

早期一般使用检测粒细胞-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)的方法来间接反映移植物中的造血干细胞数量及增殖能力。但是其结果变异性大，耗时长(至少14d)，不利于临床应用[1]；单克隆抗体结合流式细胞仪计数CD34+细胞具有检测快速、结果定量并可同时检测CD34+细胞亚群等特点，现已被广泛应用。Bittencourt等人研究发现，移植物中CD34+细胞数大于3×106/kg的患者与小于3×106/kg的患者相比较，其移植相关累计死亡率低(19% vs.37%)，术后存活率高(64% vs.40%)[2]。而且，保证移植物中足够的CD34+细胞数量还可以降低医疗花费。一项对1317份外周血采集物的调查研究显示，移植物中CD34+细胞数大于5×106CD34+/kg的患者与小于5×106CD34+/kg的患者相比较，其平均住院时间短，抗生素、抗菌素和重组人粒细胞刺激因子(rhG-CSF)的平均使用量少，平均输血次数少，因此每名患者平均可节省约3726 美金的医疗花费[3]。

因送检的标本中CD34+细胞的数量非常少(0.1～3%)，且流式细胞仪计数CD34+细胞过程中对结果产生影响的因素较多，各实验室间结果存在很大的变异性。……