钟秋明,刘 瑶,曾小斌
(赣南医学院第一附属医院,江西赣州341000)
T细胞介导的细胞免疫应答在机体抗肿瘤免疫中起着关键作用,T细胞的致敏、激活和扩增依赖于抗原呈递细胞(APC)提呈相应的抗原多肽并提供共刺激信号[1]。然而,由于许多肿瘤细胞为弱免疫原性,呈现MHC分子与共刺激分子的表达低下或缺如,致使肿瘤抗原不能得到有效的提呈,因而不能激活体内特异性的杀伤机制及诱导机体有效的抗肿瘤免疫应答[2,3]。肿瘤细胞经甲醛固定后其抗原性和免疫原性得以保留,但致癌性大为减弱[4~9],将其注入肿瘤细胞可有效诱导T细胞介导的细胞免疫。IL-2是体内功能最强的淋巴细胞增殖因子,是有效的抗肿瘤细胞因子[1]。2011年3月~2012年5月,我们建立了小鼠H22细胞皮下移植瘤模型,并联用IL-2和甲醛固定的H22细胞对其进行免疫治疗,效果满意。现报告如下。
1.1 实验动物分组及模型的建立 雌性昆明种小鼠20只,体质量15~20 g,4~6周龄,购自赣南医学院。每只小鼠股部皮下接种1×105个H22肝癌细胞,待肿瘤平均直径达1 cm为模型建立成功。本组20只小鼠均成功造模。随机分为A、B、C、D组,各5只。
1.2 主要试剂及材料 小鼠H22肝癌细胞由赣南医学院第一附属医院临床科研中心保存,小鼠腹腔传代。RPMI1640培养液购自Sigma公司,胎牛血清购自杭州四季清生物工程材料研究所。四甲基偶氮唑盐(MTT)为Amresco公司产品。重组人白介素-2 (rhIL-2)购自厦门特宝生物工程有限公司。兔抗鼠CD8购自eBioscience公司。链霉素—卵白素—生物素—过氧化物酶复合物(SABC)试剂盒、二氨基联苯胺(DAB)试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司。……