不同胎牛血清、培养瓶体外培养大鼠骨髓间充质干细胞效果比较

何丁文，邬亚华，殷 明，魏强强，殷嫦嫦

(1南昌大学第二附属医院，南昌330006;2九江学院)

骨髓间充质干细胞(BMSCs)是来源于中胚层的具有自我更新和多向分化潜能的成体干细胞之一，不仅可分化成中胚层来源的多种细胞，如骨细胞、成骨细胞、脂肪细胞等，且可分化成内皮细胞［1］、神经细胞［2］及内胚层来源的细胞［3］，此外BMSCs具有特殊的免疫逃避及抑制特性［4］，可用于异体移植，随着干细胞治疗临床应用的兴起，BMSCs已成为重要种子细胞来源，在临床可用于创伤后神经修复、软骨损伤修复、细胞替代治疗等，是最具临床应用前景的干细胞之一。体外获取、分离及纯化BMSCs是干细胞治疗的关键环节。2012年1～3月，我们比较了普通、高纯度胎牛血清培养基及塑料瓶、玻璃瓶体外培养全骨髓贴壁法分离的骨髓间充质干细胞的效果，旨在建立一种简便、有效、稳定的BMSCs分离培养体系。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 健康4周龄SD大鼠6只，雌雄不限，由南昌大学动物科学部提供，实验过程中对动物的处置符合2006年科技部《关于善待实验动物的指导性意见》的规定。

1.1.2 主要试剂和仪器设备 DMEM、0.25%胰蛋白酶－EDTA消化液、标准胎牛血清、PBS粉、DMSO (Solarbio公司)，DMEM/F12(HyClone公司)，高纯度胎牛血清(GIBCO公司，南美产)，一次性塑料培养瓶(CORNING公司)，CO2恒温孵育箱(SIM公司)，超净工作台(苏州净化设备有限公司)，倒置相差显微镜及照相系统(NIKON公司)。

1.2 方法

1.2.1 BMSCs分离培养 将健康4周龄SD大鼠乙醚麻醉后颈椎脱臼法处死，75%乙醇浸泡10 min，将SD大鼠转入超净台内，无菌条件下取双侧……