orexin-B细胞及其神经纤维在癫痫模型大鼠癫痫发作不同时间点的变化及其意义

陈福顺，王 卓，王湘庆，郎森阳

(解放军总医院神经内科，北京 100853)

癫痫是由大脑神经元异常放电导致的中枢神经系统功能失常的脑部疾病，具有突然发生、反复发作的特点。目前的抗癫痫药物大多通过降低神经元兴奋性或增加抑制性神经递质起作用。γ-氨基丁酸(GABA)是中枢内重要的抑制性神经递质，多年来癫痫的发生被认为是中枢内GABA抑制作用减弱或缺乏的结果。orexin又称hypocretin，因其首先于1998年在下丘脑发现，并与食欲有关，故命名为食欲素，包括orexin-A和orexin-B(又称为食欲素A型和食欲素B型)，均为orexin前体的分解产物[1-2]，其受体共有2种亚型—orexin1R及orexin2R，广泛分布于整个中枢神经系统[1-5]，此后又发现其与交感神经活动[6]以及睡眠和觉醒状态的调控有关[7-8]，而对于其与癫痫的有关研究，有实验[9]证实orexin能增强GABA电流，也有报道[10]认为反复癫痫发作患者腰穿脑脊液中orexin-A浓度少于非癫痫患者，但有关orexin-B的研究尚未见报道。因此，orexin可能与癫痫的发生或控制有关。目前对于orexin-B在癫痫发作后多时间点变化的研究国内外均未见报道，因此本研究采用海人酸(kainic acid，KA)腹腔注射诱发大鼠癫痫发作，用免疫组化方法检测orexin-B及其神经纤维在不同时间点的变化情况，以阐明orexin-B在癫痫发生中的变化，深化癫痫的发病机制，且为癫痫治疗开拓一个新的领域。

1 材料与方法

1.1 实验动物、主要仪器和试剂成年雄性Wistar大鼠30只，体质量250～300 g，由解放军总医院动物中心提供。冰冻切片机为Lei CA CM1900，Olympus BX53显微镜，KA(编号KA0250)购自Sigma公司，羊抗orexin-B多克隆抗体(编号SC-8071)为Santa Cruz公司产品，超敏即用型二步法(非生物素)检测试剂盒(编号PV-9003)购自北京中杉金桥生物技术有限公司。……