蔡宝平,李风鸣,郑红梅,杨磊,邵芳,卢祥云,顾志良
(常熟理工学院生物与食品工程学院,江苏常熟 215500)
松江鲈MyoD基因cDNA部分片段的序列和表达特征分析
蔡宝平,李风鸣,郑红梅,杨磊,邵芳,卢祥云,顾志良
(常熟理工学院生物与食品工程学院,江苏常熟 215500)
生肌决定因子MyoD是生肌调节因子MRFs家族的一个重要成员,在基因转录调控中起着重要的作用.本实验通过RT-PCR和3’-RACE等方法,以松江鲈肌肉总RNA为模板,扩增出957 bp的MyoD基因部分序列,包含部分编码区长567 bp,编码翻译188个氨基酸残基,3’-UTR区长390 bp.系统发育分析表明,松江鲈MyoD与奥尼罗非鱼亲缘关系最近.不同组织半定量分析显示,松江鲈MyoD在各种组织中均有表达,在心脏中表达量最高,预示着在不同组织中该基因的功能广泛.
松江鲈;生肌决定因子;3’-RACE;组织表达
动物肌肉的形成是一个复杂的过程,受包括MRFs家族在内的多种细胞内转录因子的调控.MRFs家族由MRF4、MyoG、MyoD和Myf5四个基因组成.该家族基因具有一个保守的碱性螺旋-环-螺旋结构域(bHLH)[1].通过该结构域,MRFs可以和E蛋白形成二聚体从而和下游靶基因如肌球蛋白轻链、肌酸激酶等基因上游的E-box(CANNTG)结合而激活该基因表达[2].研究表明MyoD和Myf5首先在前体节细胞中表达,在体节功能的发挥及成肌细胞的形成中起重要作用,而MyoG和MRF4的表达要相对晚一点,在肌细胞的最终分化中起作用[3].
MyoD基因是脊椎动物胚胎期肌肉发育的主导调控基因之一,在肌肉特异性基因转录调控中起着总开关的作用.MyoD主要在成肌过程中起……