扶正肺瘤方对黑色素瘤B16体内抑制作用的研究

欧阳郴生，赵 霞，古宏晖，杨丽娜，陈 钟，汪桃利

(深圳市中医院 肿瘤科，广东 深圳 518033)

扶正肺瘤方是我科临床长期运用的治疗肺癌的中药复方，具有一定的临床疗效，为进一步研究其确切作用，我们通过建立BALB/C无胸腺裸小鼠黑色素瘤B16模型,观察扶正肺瘤方对肿瘤生长和转移的作用，研究如下。

1 材料

1.1 动物 BALB/C无胸腺裸小鼠，体质量18～20 g，4～5周龄，清洁级，36只，雌雄各半，中国医学科学院动物研究所提供，饲养环境为无特殊病原体条件(SPF)。

1.2 瘤株 黑色素瘤B16，购自中山医科大学肿瘤研究所。

1.3 供试品 扶正肺瘤方，由本院制剂室提供，用生理盐水配制成不同浓度药液,2～8 ℃冷藏备用。

1.4 试剂 福尔马林液、双抗(链霉素100 μg/mL，青霉素100 U/mL)，胎牛血清(FBS)、胰蛋白酶，D-Hanks液、谷氨酰胺，RPMI1640培养基。

1.5 实验器材 游标卡尺，哈尔滨北量螺纹量规工具制造厂；电子天平，BS22型，德国赛多利斯；倒置显微镜，CKX31型，Olympus公司；CO2培养箱，2406-2型,美国Sheldon公司。

2 方法

2.1 黑色素瘤B16细胞培养 参照文献[1]方法，B16黑色素瘤瘤株在10%胎牛血清RPMI1640培养基(含双抗)，37 ℃，5%CO2环境中进行传代培养。取对数生长期的肿瘤细胞，吸去培养液，收集细胞，D-Hank液洗涤2次，台盼蓝染色，显微镜下计数存活肿瘤细胞，存活肿瘤细胞应大于95%。调整细胞浓度为2×107/mL。

2.2 建立黑色素瘤B16动物模型 消毒BALB/C裸小鼠右侧腋窝皮肤，注射黑色瘤B16细胞悬液，0.2 mL/只。

2.3 分组与给药 采用随机分组方法，将36只裸小鼠分为3组,每组12只。分别为扶正肺瘤方低剂量(18g/kg体质量)、高剂量(36g/kg体质量)组和模型对照组。于移植肿瘤当日始，低剂量组和高剂量组分别给予相应剂量扶正肺瘤方药液，模型对照组给予等体积生理盐水。……