白芷美白液体外抑制酪氨酸酶活性的实验研究

欧喜燕，于秀华

(长春中医药大学附属医院，吉林 长春 130021)

随着现代社会人口素质的提高，妇女对年轻化的追求越来越迫切，皮肤护理产品销售的潜在市场日益扩大。化妆品行业已经进入了一个新的时代，或者至少进入了化妆品研发领域的新阶段。传统中医药由于毒副作用小，效果显著，在护肤品中具有不可替代的作用。研究开发中药护肤品不仅可以满足不断扩大的市场需求，对传统中医药的开发也具有重大的意义。本研究主要通过体外实验，从酪氨酸酶活性抑制方面观察白芷美白液对皮肤美白祛斑的功能。

1 实验材料与仪器

1.1 实验药品 白芷美白液：由长春中医药大学附属医院实验中心提供；酪氨酸酶：购自美国Worthing-ton公司，2.5万u/25 mg，批号：20110601；磷酸氢二钠：购自北京化工厂，500 g/瓶，批号:20100203；磷酸二氢钠：购自北京化工厂，500 g/瓶，批号:20100203。

1.2 实验仪器 恒温箱：型号：GZX-9146MBE，上海博迅实业有限公司医疗设备厂；紫外-可见分光光度计：型号：Lambda25，美国Perkin Elmer公司产品。

2 实验方法

2.1 白芷美白液制备方法 白芷2 000 g，加6倍水，浸泡4 h，蒸馏4 h，收集蒸馏液，分离得到挥发油；馏液浓缩至950 mL,加入挥发油和适量赋形剂，加水制成1 000 mL,即得。

2.2 白芷美白液抑制酪氨酸酶的实验 采用蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法[1]稍加修改进行实验。白芷美白液给药组反应混合物2 mL：0.1 M pH 6.8 PBS0.9 mL加不同浓度的白芷美白液1 mL加0.03%酪氨酸0.1 mL。37 ℃的恒温箱孵育10 min,加0.1 mL的酪氨酸酶(350 u/mL)水溶液，将溶液混合均匀，置于37 ℃的恒温箱中反应25 min后,用分光光度计于475 mm测定吸光度值(A)；空白组处理以等体积的PBS代替酪氨酸酶溶液，用分光光度计于475 mm测定吸光度值(B)；……