荧光金逆行标记乳鼠视网膜神经节细胞的实验研究

李静波， 徐尤学， 方家华， 张祖海 (长江大学附属荆州市第一人民医院眼科， 荆州 434000;湖北省京山县罗店医院眼科;通讯作者，E-mail:zhangzuhai787@sina.com)

视网膜神经节细胞位于视网膜的内层，是视网膜的第三级神经元，其轴突组成视神经，将视觉信号输入大脑，在视觉通路中起着重要的传导作用。视网膜神经节细胞是青光眼以及视神经炎等病变的靶细胞，最近发现，视网膜中少数神经节细胞能够合成感光蛋白，具备了自主感光的能力，被称为自主感光神经节细胞［1］，因此，研究视网膜神经节细胞的电生理特征具有重要的意义。初生的乳鼠视网膜神经节细胞具有较强的活性，适合做膜片钳等电生理实验，在开展电生理实验之前，需要分离并鉴定细胞。

荧光金是一种性质稳定的荧光示踪剂，可用于视神经、坐骨神经等的标记。视网膜神经节细胞轴突在大脑上丘和外侧膝状体交换神经元，其中大部分投射到上丘，荧光金注射到上丘后，通过轴浆逆行运输，大约24 h后到达视网膜，视网膜神经节细胞胞体被标记，在荧光显微镜下可进行观察。国内已有荧光金逆行标记成年大鼠视网膜神经节细胞的报道［2］，但没有标记并分离乳鼠视网膜神经节细胞进行体外培养的报道。本研究中，我们拟建立荧光金逆行标记乳鼠视网膜神经节细胞的方法。

图1 显微镜下视网膜神经节细胞形态Fig 1 The morphology of retinal ganglion cells under microscope

1 材料和方法

1.1 乳鼠视网膜神经节细胞逆行标记 SD大鼠购自长江大学医学院，4%荧光金注射液购自Biotium公司。……