富铁酵母发酵条件的优化

山东宝来利来生物工程股份有限公司 徐海燕 张志焱 谷巍

目前，在国内饲料中铁元素主要以无机制剂形态添加，由于这些制剂在储存或消化过程中会被酸化，从而使Fe2+变成难吸收的Fe3+（王利伟等，2002）。无机铁与有机铁相比具有不易吸收，对黏膜有刺激性，胃肠道副作用较大和不具有生物活性的特点（Gaudreau等，2001）。研究证实，酵母是一种较为理想的微量元素载体（李志东等，2006）。对于富铁酵母而言，其主要是利用酵母细胞吸收多、转化快的特性，使其作为微量元素的载体，在细胞内将无机铁转化成有机形式，提高铁的利用率，还可为动物机体提供大量的菌体蛋白、多肽、小肽、消化酶、氨基酸、丰富的B族维生素以及其他生物活性物质（许祯莹等，2010）。本试验拟研究酵母菌富集微量元素铁的影响因素，并确定富铁酵母的最佳培养条件，为富铁酵母的发酵生产提供试验依据。

1 材料与方法

1.1 菌种 5株产朊假丝酵母 （Candida utilis），编号为 CRJ1、CRJ2、CRJ3、CRJ4、CRJ5；2 株啤酒酵母，编号为PJ1、PJ2。均由山东宝来利来生物产业集团生物研究院菌种保藏中心提供。

1.2 培养基 斜面培养基：PDA培养基；种子培养基：10°Bx的麦芽汁培养基，取1份麦芽粉加5份水，65℃水浴中保温4 h，使其糖化，直至糖化完全 （检查方法是取0.5 mL的糖化液，加2～3滴碘液，如无蓝色出现，即表示糖化完全）；发酵培养基：采用YPD培养基，葡萄糖40 g/L、蛋白胨10 g/L、酵母浸膏5 g/L、磷酸氢二钾2 g/L，pH 6.0。

1.3 主要试剂 硫酸亚铁、硫酸铁铵、硝酸铁、邻二氮菲、盐酸羟胺等均为分析纯。

1.4 主要仪器 高压灭菌锅、超净工作台、酸度计、超声波破碎仪、恒温培养箱、摇床、UV-2000紫外可见分光光度计、电子天平、高速离心机、电热板等。……