传染性法氏囊病病毒PY05株的分离鉴定

卢佳 张宇耕 崔保安 李新生 刘媛媛 陈礼鹏 岳旭龙 王俊亚

摘要：为了分离到鸡传染性法氏囊病（Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｂｕｒｓａｌｄｉｓｅａｓｅ，ＩＢＤ）病毒，从河南省濮阳地区某疑似感染鸡法氏囊病病毒的鸡场采集病料，用ＳＰＦ鸡胚对病毒进行分离培养，通过琼脂扩散试验和ＲＴ－ＰＣＲ扩增ＶＰ４片段对其进行鉴定。结果显示该毒株能引起鸡胚规律性死亡，且出现ＣＡＭ增厚、鸡胚出血等明显病变；待检抗原、标准阳性血清之间出现阳性沉淀线；琼脂电泳得到大小约为１ ２００ｂｐ片段，与预期结果相符。结果证明该分离株为ＩＢＤＶ地方株，并命名为ＰＹ０５株。

关键词：鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）；分离；鉴定

中图分类号：Ｓ８５８．３１文献标识码：A文章编号：１００７－２７３Ｘ（２０12）04-0009-02

鸡传染性法氏囊病（Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｂｕｒｓａｌ ｄｉｓｅａｓｅ，ＩＢＤ）是由鸡传染性法氏囊病病毒（Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｂｕｒｓａｌ ｄｉｓｅａｓｅ ｖｉｒｕｓ，ＩＢＤＶ）引起的鸡的急性、高度接触性、杀淋巴细胞性传染病［１］。该病主要侵害３～１２周龄幼鸡，以损伤鸡的法氏囊为主要特征，使鸡群产生严重、长期的免疫抑制，从而对其他细菌及病毒性疾病继发感染的敏感性增加［２］。给养殖业带来严重的经济损失。本试验从河南省濮阳地区某鸡场疑似传染性法氏囊病的鸡群中采集病料进行分离，通过血清学等方法对该毒株进行了鉴定。现将鉴定过程报告如下。

１材料与方法

１．１材料

病料采自河南省濮阳地区某小型养鸡场的疑似传染性法氏囊病病鸡的法氏囊、脾脏组织；ＳＰＦ鸡胚及ＳＰＦ鸡购自北京梅里亚维通实验动物技术有限公司；ＩＢＤＶ阳性血清购自中国兽医药品监察所；ＲＮＡ提取试剂盒购自上海捷瑞生物工程有限公司。

１．２方法

１．２．１病料的处理将采集的病料剪碎、充分研磨后按１∶３的比例加入灭菌的ＰＢＳ液，制成匀浆后反复冻融３次，３ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，将处理后的悬液用无菌ＥＰ管分装，于－８０℃保存备用。……