莱克多巴胺免疫抗原与多克隆抗体的制备

申宏丹　王记莲

摘要：采用碳化二亚胺－Ｎ－羟基琥珀酰亚胺（ＥＤＣ－ＮＨＳ）法将莱克多巴胺（ＲＡＣ）与活化的牛血清白蛋白（ＢＳＡ）偶联，合成了免疫抗原（ＲＡＣ－ＢＳＡ），经聚丙烯酰胺凝胶电泳法和紫外吸收法鉴定偶联成功。用合成的免疫抗原免疫家兔获得了高效价的多克隆抗体，采用所得抗体和辣根过氧化酶标抗原建立莱克多巴胺直接竞争酶联免疫吸附分析法（ELISA），标准曲线呈典型Ｓ型，具有良好的线性关系。

关键词：莱克多巴胺；抗原；抗体；酶联免疫吸附分析法（ELISA）

中图分类号：Ｓ８５９．８４ 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０12）24－5736-03

莱克多巴胺属于β２－兴奋剂的一种，是一类结构和功能类似肾上腺素和去甲肾上腺素的苯乙醇胺类衍生物，它可以加快畜禽的生长速度，降低酮体脂肪含量，提高瘦肉率。β２－兴奋剂常见的有盐酸克伦特罗、莱克多巴胺及沙丁胺醇等。随着我国对盐酸克伦特罗监管力度的加大，盐酸克伦特罗的非法应用得到了有效的控制，莱克多巴胺作为其替代品，非法应用日益猖獗。由于莱克多巴胺在动物组织中残留可能对人体产生很多不利影响，所以我国农业部、卫生部和国家药品监督管理局明文禁止莱克多巴胺用于动物养殖［１－４］。关于莱克多巴胺的检测方法主要有仪器检测和免疫检测两种，免疫检测法主要包括酶联免疫法、化学发光免疫法、免疫芯片法以及胶体金层析法［５，６］。质量良好的抗原和抗体是免疫检测法的基本和关键条件。该试验从改进合成免疫抗原的条件入手，制备了莱克多巴胺多克隆抗体，为以后更好地开发对莱克多巴胺的免疫检测方法做好了前期探索工作，对保障我国食品安全和医疗安全等具有十分重要的意义。……